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利用手性选择剂构建手性分离环境,在分离通道内,通过添加流动相手性选择剂或将其制备成固定相实现手性拆分是手性分离分析常规的研究手段。论文对近年来在手性选择剂方面的发展,特别是单一分离体系和多元分离体系方面做了简要综述,概括了当前手性分离的研究进展;并对拉米夫定的研究现状做了简要概述,论文着重针对拉米夫定手性分离体系鲜见报道的现状构建了新方法。拉米夫定是目前使用较为广泛的胞嘧啶核苷类抗病毒药物,已经应用到抗乙型肝炎病毒(HBV)和抗艾滋病病毒(HIV)的治疗上。临床以左旋体给药,右旋体存在较大的细胞毒性。建立有效的手性拆分体系,对于检测或纯化有效成分应具有学术价值及实际应用前景。论文以有自主知识产权的三种β-环糊精衍生物(其中1种获国家专利授权)为手性选择剂,以高效毛细管电泳法(HPCE)和高效液相色谱法(HPLC)为分析手段,构建拉米夫定对映体或非对映体混合物的手性分离环境,以期实现手性拆分。本课题分别将双-(6-氧-间羧基苯磺酰基)-β-环糊精(β-CD-M1)、双-(6-氧-间硝基苯磺酰基)-β-环糊精(β-CD-N2)和双-[6-氧(3-脱氧柠檬酸单酯-4)]-β-环糊精(β-CD-B2)作为手性选择剂,在75μm毛细管柱内构建手性环境,制备成HPCE手性整体柱。为验证其柱内键合情况,通过场发射扫描电镜(SEM)对其内部形貌进行考察。分别用β-CD-M1、β-CD-N2和β-CD-B2手性柱,在HPCE中对拉米夫定对映体混合物A进行手性拆分。通过分离条件优化,分离原理讨论,分别建立了拉米夫定对映体混合物A在三种手性选择剂中的分离方法。其中在β-CD-M1HPCE手性柱中的最佳分离条件为:50mmol/L Tris-磷酸缓冲液pH5.1、分离电压18kV、检测波长270nm、分析时间10min,分离度RS达12.87;在β-CD-N2HPCE手性柱中的最佳分离条件为:背景缓冲液为50mmol/L Tris-磷酸缓冲液pH4.1、分离电压-23kV、检测波长270nm、分析时间20min,分离度RS达55.95;在β-CD-B2HPCE手性柱中当背景缓冲液为50mmol/L Tris-磷酸缓冲液pH2.8,工作电压为-23kV,检测波长270nm时,分离度RS达48.35。比较实验结果发现,拉米夫定对映体混合物A在三种手性选择剂体系中都获得手性拆分,β-CD-B2柱材料的耐酸性较强;在β-CD-M1手性HPCE整体柱中线性范围较β-CD-N2手性HPCE整体柱窄;由SEM结果显示β-CD-M1柱内材料键合结构既有致密层,也有稍大的网状孔结构,且柱内微孔结构较为稳定,流动相渗透性好,β-CD-N2手性整体柱内材料键合情况不够致密,存在较大空隙,且稳定性劣于β-CD-M1手性整体柱,在某些特定介质中使用一段时间致密键合材料会出现脱落现象。为克服两种柱材料各自存在的局限性,将两种手性选择剂以一定比例混合制备成HPCE手性整体柱,期望取长补短优化其分离效能。将一定量的β-CD-M1、β-CD-N2以一定比例混合作为主要功能单体,分别与适量次功能单体、交联剂、致孔剂及引发剂等超声混合后填入毛细管柱内,恒温加热引发原位聚合反应,制备混合材料HPCE手性整体柱,用SEM手段表征其柱内键合情况,结果显示,选择β-CD-M1:β-CD-N2=1:2为最佳混合比例,SEM结果显示这种混合HPCE整体柱克服了单一选择剂β-CD-N2柱材料不稳定的弊端,并将拉米夫定混合物和布比卡因对映体作为分析对象,验证其分离能力。初步结果表明,在工作电压18kV、50mmol/L Tris-磷酸缓冲液pH4.8~5.2的分离体系中,拉米夫定非对映体混合物B得到拆分,最大分离度RS达13.20;在pH4.0~5.0的范围内,布比卡因对映体有拆分迹象。为进一步建立拉米夫定混合物手性纯化体系,用β-CD-B2为手性固定相,在HPLC中构建手性分离环境,拉米夫定对映体混合物A得到了手性拆分。最佳分离条件为5mmol/L柠檬酸-三乙胺pH4.0为缓冲液,乙腈为有机添加剂,V缓冲液:V乙腈=45%:55%,流速0.80mL/min,检测波长270nm,柱温20℃,分离度RS达3.97。分别以β-CD-M1和β-CD-N2两者为手性选择剂构建的手性HPLC柱中,用同样的流动相,均未达到拆分拉米夫定对映体混合物A的结果。而在HPCE中可分别拆分拉米夫定对映体混合物A的β-CD-M1和β-CD-N2两种手性选择剂在HPLC中对拉米夫定对映体混合物A基本无拆分能力。说明在同一流动相环境中,HPLC中手性选择剂β-CD-B2羧基含量高可使拉米夫定两对映体与固定相的结合力差异加大,没有苯环大π键的作用也不影响其拆分能力。论文探究了普罗帕酮手性药物在β-CD-N2手性HPCE整体柱中的分离情况,得到其最佳分离条件为40mmol/LTris-磷酸缓冲液pH4.0,工作电压-25kV,检测波长254nm,分析时间15min,分离度RS达52.82。对其分离机理进行了初步讨论:衍生化的β-CD-N2中苯环与普罗帕酮中的苯环产生π-π共轭作用,硝基、磺酰基团与对映异构体的协同作用,增强了β-CD-N2衍生物与普罗帕酮两对映异构体的手性选择性差异,使得普罗帕酮对映体在适宜的条件下获得拆分。