卵巢恶性肿瘤患者ECR1密度基因多态性的实验与临床研究

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研究内容:1.ECR1密度基因多态性PCR-RFLP检测方法的建立及应用;完成了ECR1密度基因多态性PCR-RFLP检测方法最适条件的优化,对三种ECR1密度基因型PCR扩增片段进行克隆,制成基因型标准对照,完善了检测方法.整个操作过程可在6~7小时内完成,提示该方法特异性强、灵敏度高,稳定且操作简便、快速.首次对189例体检正常人的ECR1密度基因多态性进行检测.结果显示:中国人群中ECR1密度基因型亦分HH、HL、LL型三种,其中HH占79%、HL型占18%,LL型占3%.1.卵巢恶性肿瘤患者ECR1密度基因型、CR1数量表达及活性检测;为了探讨红细胞免疫功能与卵巢恶性肿瘤发病之间的关系,利用已建立的PCR-RFLP方法检测51例卵巢恶性肿瘤,43例卵巢良性肿瘤及40例正常对照的ECR1密度基因型,利用流式细胞仪技术检测ECR1分子数量,用肿瘤红细胞花环测定ECR1活性,进行比较分析.并比较了ECR1基因型差异与NK活性及红细胞调控淋巴细胞免疫粘附功能之间的相关性.结果显示:ECR1密度基因型及ECR1活性的改变可能与卵巢肿瘤的发病有关.卵巢恶性肿瘤患者HL、LL型比例明显高于正常对照,推测ECR1密度基因的遗传缺陷可能是卵巢恶性肿瘤易感因素之一.对HL型,特别是LL型人群进行监测,结合其它高危因素进行筛查,对早期诊断卵巢恶性肿瘤患者可能有所帮助.3.卵巢恶性肿瘤患者ECR1密度基因多态性检测的临床意义;通过对46例随访完整的卵巢恶性肿瘤患者临床资料的回顾性分析,采用寿命表法计算生存率,log-rank检验生存率差异,逐步Cox回归法分析影响预后因素.结果表明,卵巢恶性肿瘤的FIGO分期、残留灶大小、手术方式、ECR1基因型是影响预后的独立因素(P<0.01).ECR1基因型对判断卵巢恶性肿瘤患者预后有意义,HH型患者预后显著好于LL型患者(P<0.01).4.卵巢恶性肿瘤患者红细胞CD44s表达及其临床意义;采用流式细胞仪方法定量检测了62例卵巢恶性肿瘤,28例正常对照及32例卵巢良性肿瘤患者红细胞中CD44s的表达水平.结果显示:卵巢恶性肿瘤患者红细胞CD44s的表达显著低于对照组,与病理类型不呈相关性(P>0.05),但与临床分期及组织学分级相关(P<0.05或P<0.01).提示红细胞CD44s表达水平的高低可能作为卵巢恶性肿瘤辅诊指标之一.红细胞CD44s表达水平越低,恶性肿瘤分化程度越差,越易转移.在临床工作中检测红细胞CD44s的表达水平,对帮助诊断、评估卵巢肿瘤的进程,有无转移具有潜在意义,有助于制订适宜的治疗方案及进行预后分析.
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