肝细胞癌中CHFR、EDNRB和3-OST-2基因甲基化状态研究

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目的:了解肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中CHFR、EDNRB和3-OST-2启动子区异常甲基化状态及其与患者临床资料之间的关系。方法:应用甲基化特异性PCR(methylation-sepcific PCR,MSP)技术,检测40例癌组织及相应癌旁组织标本,以及4例HCC细胞株、14例肝血管瘤患者肝脏和2例肝移植供肝标本,了解CHFR、EDNRB和3-OST-2基因在上述标本中的甲基化状态,并分析其与临床资料之间的相关性。结果:HCC癌组织中CHFR、EDNRB和3-OST-2基因的甲基化率分别为52.5%、27.5%和12.5%;相应癌旁组织中3个基因甲基化率分别为27.5%、27.5%和0%;14例肝血管瘤患者肝脏和2例肝移植供肝组织中没有发现上述3种基因的异常甲基化;4例HCC细胞株中3个基因甲基化率分别为100%、100%和0%。60%的癌组织和42.5%的癌旁组织至少有1种基因发生了甲基化。癌组织中只出现1种基因甲基化的标本为11份(27.5%),2种基因甲基化的为13份(32.5%);癌旁组织中有12份标本出现1种基因甲基化(30%),5份标本出现2种基因甲基化(12.5%),没有任何一份癌组织或癌旁组织发生3种基因全部甲基化。CHFR基因和3-OST-2基因在癌组织中的甲基化率高于癌旁组织(P<0.05),而EDNRB基因在两者间差异无统计学意义。但是,3-OST-2基因启动子异常甲基化非常少见,癌组织中甲基化率为12.5%(5/40),癌旁组织中没有发现甲基化现象。CHFR基因在癌组织和癌旁组织的甲基化率分别为52.5%和27.5%,癌组织中的甲基化率高于癌旁组织(P<0.05)。EDNRB基因在癌组织和癌旁组织中的甲基化率都为27.5%。3-OST-2基因在癌组织中甲基化率为12.5%,癌旁组织没有发现甲基化。16例正常肝组织中没有发现上述3种基因的异常甲基化。癌组织中CHFR基因甲基化与非甲基化患者性别相比,男性多于女性。癌旁组织中EDNRB基因甲基化患者肿瘤的包膜出现率低于非甲基化患者。癌组织中3-OST-2基因甲基化患者的年龄大于非甲基化患者,在肿瘤直径上甲基化患者也大于非甲基化患者。结论:多基因启动子甲基化在HCC中是一种普遍现象;MSP是一种敏感性和特异性较高的甲基化检测方法;CHFR基因甲基化是肝细胞癌中的频发事件,可能参与肝细胞癌发生与发展;EDNRB基因甲基化的肿瘤可能具有更高的侵袭性和容易发生转移;3-OST-2基因启动子甲基化可能不是肝细胞癌发生的主要机制。
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