目的:本课题利用超临界萃取技术（SFE-CO₂）提取香附挥发油（以下简称XF）,研究其对多种肿瘤细胞的抑杀作用,从细胞、分子水平探讨其抗癌机制。方法:1.采用不加夹带剂的SFE-CO₂法提取XF。2.以MTT法测定细胞活力,以正常肝细胞株（LO2）作为对照,评价药物抑制肿瘤细胞（HepG2、A549、PC12、LNcap）生长和杀灭作用。3.以HepG2为实验对象,研究XF抗肿瘤作用的分子机制:（1）测定细胞内MDA、SOD水平探讨氧化损伤在XF杀伤HepG2细胞机制中的意义;（2）采用Hochest33342荧光染色法、Annexin V-EGFP/PI双重荧光染色法和流式细胞仪检测观察细胞凋亡;（3）采用Rh 123荧光染色测定细胞内线粒体膜电位（Δψ）的变化;（4）采用Muse?Bcl-2活性双重检测试剂盒检测细胞群中总Bcl-2蛋白和磷酸化Bcl-2蛋白的比例;（5）Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平。结果:1.SFE-CO₂萃取得棕黄色XF,平均得率1.073%。2.XF对4株肿瘤细胞均表现出强力杀伤作用,对HepG2、A549、PC12、LNcap作用72 h的IC₅₀分别为43.4、71.9、75.3、75.4μg/ml,以LO2为对照,发现XF对HepG2细胞具有选择性杀伤作用,而临床广泛使用的阳性对照药顺铂（DDP）对其选择性较差,XF比DDP更安全。3.分子水平研究XF抗肿瘤作用机制发现:（1）XF可致HepG2细胞发生严重氧化损伤,表现为细胞内MDA明显升高,SOD活力显著降低;（2）Hochest33324荧光染色和Annexin V-EGFP/PI双染检测发现,XF能浓度依赖性诱导HepG2细胞凋亡;Annexin V-EGFP/PI流式细胞仪检测,XF在浓度为200μg/ml下作用6 h,HepG2细胞晚期凋亡率高达97%,充分证明诱导凋亡是XF抗癌机制。（3）Rh123荧光染色实验表明,XF能剂量依赖性引起线粒体损伤,Δψ崩溃。（4）XF引起Bcl-2蛋白去磷酸化;（5）XF通过升高Bax/Bcl-2比值,从而引起细胞凋亡。结论:1、XF具有高效体外抗肿瘤作用,最大抑杀率高达99%以上。2、诱导凋亡是XF抗肿瘤作用机制。其分子机制为（1）触发过氧化应激损伤线粒体,（2）诱发Bcl-2蛋白去磷酸化失活和升高Bax/Bcl-2比值,从而启动内源性凋亡通路。3、XF对肿瘤细胞有一定选择性,与DDP相比较,高效且相对安全。因此,XF有望研发成为有自主知识产权的抗肿瘤新药,潜力大,前景好。