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第一部分:亚低温治疗小鼠动物模型的建立 目的:探究合适的亚低温温度范围,确定建立亚低温治疗小鼠动物模型的方法。 方法:将20只雄性BALB/C小鼠随机分为4组,即正常对照组,36-38℃实验组,30-33℃实验组和28-30℃实验组,每组5只。麻醉小鼠后监测其肛温,使其在相应的温度范围,维持4-6h后逐渐复温,24h后检测其外周血白细胞、生化指标和电解质状况,以判断亚低温是否对小鼠造成了影响。 结果:36-38℃和30-33℃对正常动物的外周血白细胞、肝功能、肾功能和电解质基本无影响,28-30℃可影响动物的电解质,可引起高钾血症。 结论:30-33℃亚低温干预小鼠模型是本实验理想的造模条件。 第二部分:重度骨髓型急性辐射损伤小鼠模型的建立 目的:探究合适的辐照剂量范围,确定建立重度骨髓型急性辐射损伤小鼠动物模型的方法。 方法:将138只雄性BALB/C小鼠随机分为3组,即0Gy照射组、6Gy照射组和8Gy照射组,每组46只。分别接受0Gy,6Gy,8Gy60Coγ射线单次全身照射,照射当天计为第0天。每组取10只用于动态观察小鼠状态、体重和外周血白细胞数,另外36只用于观察小鼠骨髓病理组织学、骨髓单核细胞计数、骨髓微核发生率变化趋势,于照后第1、3、7、14、21、28天每组取6只。 结果:0Gy照射组和6Gy照射组小鼠存活率为100%,而8Gy照射组仅为20%,照射后6Gy照射组和8Gy照射组小鼠表现、外周血白细胞计数、骨髓病理组织学、骨髓有核细胞数及骨髓微核率变化趋势均较为一致,提示6Gy照射组较8Gy照射组达到造模要求并能排除其他因素对进一步实验造成的影响。 结论:本研究结果可见BALB/C小鼠经6Gy60Coγ射线单次全身照射后可建立重度骨髓型急性放射病小鼠模型。 第三部分:亚低温与氨磷汀对辐照后小鼠辐射防护作用的比较 目的:比较亚低温与氨磷汀对辐射损伤小鼠辐射防护作用效果。 方法:140只雄性BALB/C小鼠按随机数字表法分为4组,即单纯照射组、亚低温组、氨磷汀组和正常对照组,每组35只。单纯照射组、亚低温组、氨磷汀组小鼠均接受6 Gy60Coγ射线单次全身照射,亚低温组在照后即刻进行亚低温干预并维持6h,氨磷汀组小鼠接受照射前半小时腹腔注射氨磷汀,观察骨髓病理组织变化,检测照后1、3、7、14、21、28 d小鼠骨髓有核细胞数,照后6和24 h小鼠血清MDA含量、GSH-px和SOD活力,骨髓细胞周期变化,骨髓细胞凋亡,并做统计学分析。 结果:亚低温组骨髓有核细胞数在照后3d和7d均低于氨磷汀组(P<0.01、P<0.05)。骨髓病理组织变化亚低温和氨磷汀两组变化相似。照后6h,亚低温组SOD活力高于单纯照射组和氨磷汀组(P<0.01),亚低温组 GSH-px活力高于氨磷汀组(P<0.05);G2/M期细胞氨磷汀组相对亚低温组更高(P<0.05);亚低温组细胞总凋亡率高于氨磷汀组(P<0.01)。照后24h,亚低温组和氨磷汀组MDA含量、SOD活力、GSH-px活力和细胞凋亡率相对无差异。 结论:从骨髓损伤及修复方面来看,亚低温对小鼠的辐射防护效果不如氨磷汀,但也发挥了一定的防护作用,两者的作用机制可能不同。