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金银花叶多酚具有多种重要的生理功能,如抗氧化、抑制心脑血管疾病、抑菌、抗肿瘤、保护肝脏等,多酚在金银花叶中含量较高,为更好地开发利用我国丰富的金银花叶资源,本文研究了金银花叶活性物质HPLC检测条件,研究不同采集月份,江西、山东、河南不同产地金银花叶多酚的指纹特性,对多酚中酚酸、黄酮进行分离并研究总多酚、绿原酸、黄酮的抗氧化活性。1金银花叶活性物质HPLC测定采用Alltima C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),用乙腈和0.4%磷酸水溶液梯度洗脱,柱温40℃,检测波长238nm,流速0.7mL/min,进样量10μL测定,检测时间为55min。提取方法影响金银花叶活性物质的含量,样品用50%甲醇超声提取30min的提取效果最好。优化的方法精密度高、稳定性好、重现性佳,可应用于金银花叶资源质量标准建立与完善。2生长环境会影响金银花叶中活性物质的含量,以绿原酸为参照峰,金银花叶活性物质不同生长期含量差异较大,并呈现一定的规律,5、6、7月的色谱图与对照相似度低于0.90,其余月份色谱图与对照相似度均较高,达0.90以上,以含量较多的2号峰绿原酸与6号峰为标准,金银花叶片的最佳的采收时间为7月。分析山东平邑、河南密县、江西南昌金银花叶的多酚,山东平邑、河南密县彼此相似度较高,达到0.929,而它们与江西南昌的相似度低于0.90;前两者峰3、4含量较高,而江西的金银花叶中峰2绿原酸含量较高。3将纯度为71.24%的金银花叶多酚作为原料,研究NKA-Ⅱ树脂对酚酸组分和黄酮组分的分离,HPD500大孔树脂和Sephadex LH-20凝胶树脂进一步分离、纯化绿原酸的工艺。NKA-Ⅱ树脂的初步分离中,20%乙醇洗脱酚酸组分及其绿原酸含量为52.16%,50%乙醇洗脱黄酮组分,采用浓缩、冷析处理,沉析物中黄酮含量为91.64%;利用HPD500大孔树脂以30%乙醇分离绿原酸,含量可达77.25%,进一步利用Sephadex LH-20凝胶树脂以20%乙醇纯化绿原酸,可得到绿原酸纯品,纯度为95.01%,纯化效果较好。4研究金银花叶多酚的体外抗氧化活性,测定金银花叶多酚、黄酮组分、绿原酸纯品的还原力、清除羟基自由基、DPPH·自由基和ABTS·+自由基的能力。金银花叶总多酚、黄酮组分、绿原酸纯品具有较好的抗氧化活性,在还原能力、清除DPPH·自由基和ABTS·+自由基的能力方面:绿原酸纯品>黄酮>总多酚,清除·OH自由基的能力方面:黄酮>绿原酸纯品>总多酚。