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嵌合抗原受体(CAR)修饰的T细胞显示出的靶向性、杀伤活性和持久性为过继性细胞免疫治疗注入了新的解决方案。目前，许多关于CAR-T治疗肿瘤的临床试验正在进行，并且取得了一些可喜的成果。肿瘤抗原的选择对于CAR-T细胞的治疗效果具有一定的影响。由于肿瘤干细胞在肿瘤的快速生长和转移的过程中起着重要的作用，因此我们想探讨靶向肿瘤干细胞抗原EpCAM是否可以产生显著的抗肿瘤效应。 方法:我们首先构建了靶向EpCAM的嵌合抗原受体(EpCAM.CAR)的逆转录病毒载体pLNCX-EpCAM.CAR以及携带luciferase的逆转录病毒载体pLNCX-LUC2，并采用Takara的逆转录病毒包装试剂盒包装出相应的病毒。pLNCX-LUC2病毒感染Hela、Huh7、PC3和PC3M细胞，筛选出稳定表达luciferase的肿瘤细胞克隆用于后续的体内外实验。luciferase生物发光法检测人外周血淋巴细胞(PBL)对EpCAM+肿瘤细胞的体外杀伤作用。应用PC3M腹腔种植NOD-SCID小鼠的肿瘤模型来检测转导pLNCX-EpCAM.CAR病毒颗粒的健康人外周血淋巴细胞(PB L-CAR)对肿瘤生长的体内抑制作用;应用PC3在NOD-SCID小鼠的人工肺转移模型来检测PBL-CAR对肿瘤转移能力的抑制作用。 结果:(1)我们成功构建了靶向肿瘤干细胞抗原EpCAM的嵌合抗原受体pLNCX-EpCAM.CAR，包装好病毒颗粒，并成功转导至PBL中，转导效率为52.4％;(2) PC3细胞EpCAM阳性率约13％，且EpCAM+/PC3细胞生长速度明显比EpCAM-/PC3生长速度快;PC3M细胞EpCAM阳性率约98％，且PC3M是PC3细胞中具有高转移能力的细胞克隆，提示EpCAM可能与前列腺癌的转移相关;(3)我们在体外应用生物发光法检测PBL-CAR对前列腺癌细胞PC3和PC3M的杀伤作用:PBL-CAR对EpCAM阴性的Hela细胞无特异性杀伤，对EpCAM阳性的PC3M细胞及EpCAM部分阳性的PC3和Huh7产生特异性杀伤，并呈剂量依赖性。当PC3M细胞与PBL-CAR共培养时，PC3M显著刺激PBL-CAR增殖;(4)在PC3M腹腔种植NOD-SCID的肿瘤模型中，PBL-CAR能够显著抑制PC3M腹腔肿瘤的生长;(5)在PC3人工肺转移肿瘤模型中，PBL-CAR能显著抑制肺转移和骨转移，延长NOD-SCID的生存期。 结论:我们的数据显示PBL-CAR能显著抑制前列腺癌的生长与转移，提示靶向EpCAM或其他肿瘤干细胞抗原的过继性T细胞治疗在肿瘤的治疗中具有很大的潜能。