近年,随着糖尿病发病率的日益上升,抗糖尿病药物越来越受到重视。而通过α-葡萄糖苷酶抑制剂治疗糖尿病是一种新的途径,其已被广泛用来降低餐后高血糖。目前临床上运用的α-葡萄糖苷酶抑制剂有三种,即阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇,但都因其相似的不良反应而使其运用受到一定的局限,所以从天然产物中选获得更安全、高效的抑制剂是II型糖尿病治疗以及降糖保健食品开发的研究热点。小球藻是一种高蛋白、高多糖、低脂肪、富含多种维生素及矿物质的单细胞藻类,具有多种营养保健功能,其分布广,生物量大,生长繁殖速度快。CGF是小球藻有别于其他微藻的主要生物活性物质,其中含有多种组分并且具有很多生理功能,如降血糖、血压。因此,CGF在食品、饮料、保健品和医药等领域有着广阔的应用前景。到目前为止,关于小球藻生长因子(CGF)是新型的α-葡萄糖苷酶抑制剂的进一步分离纯化的研究报道较少,而CGF的提取技术及其生理活性的研究已成为欧、美、日等国家和台湾地区开发小球藻的热点。针对CGF的研究,本文主要围绕三个方面进行工作的开展:CGF提取方法的确定,α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型的建立及CGF活性成分分离纯化及鉴定。首先,在前期工作的基础上,用高压热水提取法(最佳的CGF制备方法)对小球藻生长因子(CGF)进行提取,CGF产率为19.6%。高压水提法制备的CGF提取率较高,并且操作简单、价格经济。其次,建立了最佳的α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型。结果显示:当底物浓度为10 m M,酶浓度为0.28 U/ml,反应时间为30 min时为最佳的酶促反应条件。该最佳筛选模型灵敏度和可靠性较高。利用该筛选模型检测CGF的抑制效果较好,且其浓度与抑制率成正比例关系。再者,对CGF中的活性物质进行了初步鉴定。利用最佳筛选模型定量检测CGF中大分子与小分子的抑制率,确定了活性成分所在区域。同时对活性成分的热稳定性和酸碱稳定性进行研究。结果显示,CGF中的活性物质主要存在于小分子中,且其抑制率较强,热稳定性良好,但酸碱稳定性不太理想。最后,利用层析色谱技术进一步分离纯化了CGF中小分子物质。依次经过了离子交换层析(732强酸型)、凝胶过滤层析(Sephadex-G10)、高效液相层析(HPLC)技术进行逐步分离。结果证实:在检测波长为210 nm,保留时间分别为7.7min和12.6min时分离所得到的组分具有明显的α-葡萄糖苷酶抑制率。这为今后该成分的大规模生产制备提供了技术性指导。