【摘 要】
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目的:观察转位蛋白TSPO对氧糖剥夺/复糖复氧致BV2小胶质细胞极化的作用,并初步探究TSPO在该模型中的自噬机制。方法:离体培养BV2小胶质细胞,将实验分为正常组、OGD/R组,OGD/R+小发夹RNA阴性对照组（OGD/G+NC shRNA）、OGD/R+TSPO 小发夹 RNA 组（OGD/R+TSPO shRNA）,细胞中 TSPO mRNA和TSPO蛋白的表达量分别采用qRT-PCR、W
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目的:观察转位蛋白TSPO对氧糖剥夺/复糖复氧致BV2小胶质细胞极化的作用,并初步探究TSPO在该模型中的自噬机制。方法:离体培养BV2小胶质细胞,将实验分为正常组、OGD/R组,OGD/R+小发夹RNA阴性对照组（OGD/G+NC shRNA）、OGD/R+TSPO 小发夹 RNA 组（OGD/R+TSPO shRNA）,细胞中 TSPO mRNA和TSPO蛋白的表达量分别采用qRT-PCR、Western blot方法检测。为了探讨TSPO在OGD/R中致BV2小胶质细胞损伤和自噬作用,将所有实验分组进一步采用流式细胞术和ELISA检测小胶质细胞极化,采用CCK8实验检测细胞活力、自由氧（ROS）检测细胞毒性,qRT-PCR检测各组自噬相关mRNA（p62 mRNA、LC3B mRNA、Beclin-1 mRNA、）表达情况、Western blot检测各组中自噬相关蛋白（p62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1）表达情况。结果:与正常组对比,OGD/R组中CD86明显增加,IL-6和TNF-α显著增加,M1型小胶质细胞极化显著,OGD/R组中细胞TSPO mRNA和蛋白表达显著增高,细胞生存率明显降低,细胞毒性明显升高,LC3B mRNA、Beclin-1 mRNA水平升高,p62 mRNA表达量显著下降,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白水平升高,p62蛋白表达显著下降,自噬水平被激活;与OGD/R组比较,OGD/R+NC shRNA组BV-2小胶质细胞极化,细胞活力、细胞毒性和自噬水平差异无统计学意义,而OGD/R+TSPO shRNA组小胶质细胞M1型极化显著下降,细胞生存率明显增高,细胞毒性和自噬水平显著降低。结论:抑制TSPO在氧糖剥夺/复糖复氧模型中对BV2小胶质细胞损伤有明显的保护作用,该机制可能与抑制自噬相关。
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