【摘 要】
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第一部分10 Hz脉冲磁场暴露对原代人牙龈成纤维细胞的影响目的:极低频脉冲磁场（magnetic fields,MFs）辐照作为一种有效简便的治疗方法,越来越多地被用于口腔治疗,但其对健康的潜在影响尚未阐明。牙龈成纤维细胞在口腔健康维护中发挥着重要作用,但MFs对牙龈成纤维细胞的危害报道较少。本研究旨在探究10 Hz脉冲磁场暴露对原代人牙龈成纤维细胞（human gingival fibrobla
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第一部分10 Hz脉冲磁场暴露对原代人牙龈成纤维细胞的影响目的:极低频脉冲磁场（magnetic fields,MFs）辐照作为一种有效简便的治疗方法,越来越多地被用于口腔治疗,但其对健康的潜在影响尚未阐明。牙龈成纤维细胞在口腔健康维护中发挥着重要作用,但MFs对牙龈成纤维细胞的危害报道较少。本研究旨在探究10 Hz脉冲磁场暴露对原代人牙龈成纤维细胞（human gingival fibroblast,HGF）的影响。方法:从8名患者（4名男性,4名女性）获取的健康牙龈组织中分离出原代HGFs,每个样本分为对照组和辐照组。辐照组细胞暴露于1.0 m T 10 Hz脉冲MFs 24h,而对照组细胞在相同条件下培养,不接受脉冲MF的辐照。细胞接受完辐照后,通过流式细胞术测定细胞凋亡率、细胞周期进程和细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平,通过碱性彗星试验测定细胞DNA损伤,使用CCK-8检测暴露后1至4天的细胞增殖。结果:1.采用I型胶原酶消化结合组织块原代培养法成功培养出人牙龈成纤维细胞。镜下可见细胞从组织块周围游出并增殖,传代后细胞状态良好,增殖活性强。2.暴露于10 Hz脉冲MF增加了HGF中凋亡细胞的百分比。与对照组相比,男性组和女性组的最大增幅分别为3.37%（样本M20y）和2.22%（样本F24y）。3.10 Hz脉冲MF辐照后,男性组大部分HGF的G2/M期细胞百分比降低,女性组大部分HGF的G0/G1期细胞百分比降低,S期细胞百分比增加。4.暴露于10 Hz脉冲MF会增加男性和女性样本中部分HGF的DNA断裂。5.辐照后,在所有样品的HGF中观察到细胞内ROS的升高。6.与对照组相比,HGF中的细胞增殖在辐照后的1至4天没有显着变化。结论:1.釆用I型胶原酶消化结合组织块原代培养法可成功培育出人牙龈成纤维细胞,细胞生长旺盛,增殖活性强,性状稳定,符合实验所需细胞,可作为体外的细胞模型为后续的研究奠定基础。2.暴露于1.0 m T的10 Hz脉冲MF 24小时对原代HGFs的细胞凋亡、细胞周期进程和DNA损伤具有个体和/或性别依赖性影响,而且这种影响是暂时且有限的。第二部分游离龈移植增宽植体周角化黏膜的临床应用目的:本研究旨在评估通过游离龈移植增加下颌磨牙区植体周角化黏膜宽度方面的治疗效果。方法:纳入下颌磨牙区种植体周围角化黏膜宽度不足2mm的患者,采用游离龈移植的手术方法进行手术治疗。在手术前、手术后2个月和6个月分别对种植体周围软组织相关临床指标进行记录,包括种植体颊侧的角化黏膜宽度（width of keratinized mucosa,KMW）、探诊深度（probing depth,PD）、改良龈沟出血指数（modified bleeding index,m BI）、改良菌斑指数（modified plaque index,m PI）,术后6个月对牙龈色形质进行临床评分,以评估游离龈移植增加种植体周围角化黏膜宽度的疗效。结果:本研究共纳入5例患者,均为女性。所有患者均未觉术区不适,术区创面愈合良好,未发生移植物炎症、坏死等不良预后。术后2月及术后6月复诊结果提示术后角化黏膜宽度较术前显著增加,术后2月及术后6月KMW较术前增加约4.3mm（P＜0.05）、3.86mm（P＜0.05）,手术效果较稳定,移植物收缩较小,术后6月术区角化黏膜的色形质平均评分为4.7,与周围软组织协调。术后6月平均PD较术后2月稍有增加,术后6月平均m PI及m BI较术后2月有所降低,种植体周围软组织健康,未见明显炎症发生。结论:对于下颌磨牙区种植体周围角化黏膜宽度小于2mm的区域,运用游离龈移植对角化黏膜增宽效果显著,术后6个月内,增宽的角化黏膜稳定,收缩率低,色泽质地基本与周围组织协调,修复效果良好,患者满意度高。
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