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目的本课题采用同位素相对标记与绝对定量技术(isobaric tags for relative and absolute quantitation, iTRAQ),探索慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虚证、脾胃湿热证与健康正常人之间的差异表达蛋白质,寻找慢性乙型肝炎肝郁脾虚证、脾胃湿热证的差异蛋白表达谱,初步筛选出肝郁脾虚证、脾胃湿热证的潜在生物学标志物,为慢性乙型病毒性肝炎中医证候的本质提供现代化依据,推动该病中医证候诊断客观化的研究。方法运用蛋白质组学iTRAQ技术对临床单位采集的慢性乙型肝炎肝郁脾虚证、脾胃湿热证患者及健康正常人进行蛋白质检测,采用SPSS 19.0系统、Mascot鉴定软件进行数据分析,筛选出两种证型可能的差异表达蛋白质。结果1.肝郁脾虚证组和健康对照组比较,共筛选出157个差异表达蛋白(P<0.05),其中112个蛋白上调,45个蛋白下调；脾胃湿热证组和健康对照组比较,共筛选出163个差异表达蛋白(P<0.05),其中128个蛋白上调,35个蛋白下调。2.肝郁脾虚证组和脾胃湿热证组比较,肝郁脾虚组共筛选出30个差异表达蛋白(P<0.05),22个蛋白上调,8个蛋白下调。其中,发现表达差异倍数在两倍以上的蛋白1个：TUBA1A上调表达；脾胃湿热证组和肝郁脾虚证组比较,脾胃湿热组共筛选出24个差异表达蛋白(P<0.05),22个蛋白上调,2个蛋白下调。其中,发现表达差异倍数在两倍以上的蛋白6个：ACTA2、ACTG2、ZNF628、 DEFA1、DEFA3、CaM均上调表达。3.差异蛋白与课题组前期两证型microRNA分析均表明：酶活性调节、代谢过程、细胞发育、细胞凋亡、炎症应答、免疫反应等功能为慢性乙型肝炎肝郁脾虚证相关；免疫系统、细胞杀伤、细胞凋亡、刺激反应、肌动蛋白等功能可能与慢性乙型肝炎脾胃湿热证相关。结论1.慢性乙型肝炎肝郁脾虚和脾胃湿热证组与健康对照组存在差异蛋白表达。2. TUBAIA可能是慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虚证的潜在生物学标志物；ACTA2、ACTG2、ZNF628、DEFA1、DEFA3、CaM可能是慢性乙型病毒性肝炎脾胃湿热证的潜在生物学标志物。3.肝郁脾虚证和脾胃湿热证组中,差异蛋白和课题前期研究microRNA间存在共同的功能。4.本研究探索性的应用蛋白组学iTRAQ技术,进一步证明了此技术在慢性乙型肝炎中的科学性与创新性,可为今后慢性乙肝的研究提供参考依据。