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组织工程用于器官损伤和组织缺损治疗在生物医学领域具有良好的前景。目前临床应用局限在于构建组织无法实现组织血管化,导致构建组织失效。血管化问题是组织工程取得成功的关键环节,研究生物材料对组织工程血管化过程的影响,设计和开发血管化的支架材料是组织工程对生物材料的挑战。研究表明,材料的三维结构、表面性质和生长因子释放均可显著影响血管的形成。因此本论文针对上述问题,借鉴医学、材料学领域研究方法,制备了三维多孔水凝胶支架材料,并利用纳米颗粒对生长因子包载,以期因子通过纳米颗粒与凝胶双重释放的方式促进血管化进程。论文的主要内容如下:(1)利用壳聚糖(CS)和岩藻聚糖(F)的静电作用制备纳米颗粒,通过测定Zeta电位、PDI、粒径等参数筛选得到组合为C5F5、C2F5纳米颗粒,红外结果显示纳米颗粒有效制备。并对纳米颗粒C5F5、C2F5进行血管内皮生长因子(VEGF)和基质细胞衍生因子(SDF-1)包载,同样测定其Zeta电位、PDI、粒径等参数筛选得到包载因子的纳米颗粒C5F5-SDF-1、C2F5-VEGF。成功实现因子负载,透射电镜显示颗粒为圆球状,尺寸范围在50～200nm。(2)采用壳聚糖(CS)/β-甘油磷酸钠(β-GP)/明胶(G)制备可注射温敏水凝胶,测定了凝胶时间、动态粘弹性、流变性质和凝胶的形貌以及细胞生长行为。测定结果表明CS/β-GP/G水凝胶可原位成胶具有温敏性,凝胶时间可根据CS浓度和CS与β-GP的体积比调整,37℃体温时候其配比浓度为5:1;同时SEM电镜显示该水凝胶为多孔的网络状结构孔径为20～50μm。细胞行为研究表明该温敏凝胶无细胞毒性,细胞在三维凝胶表面呈圆球状。(3)通过ELISA测定因子(VEGF/SDF-1)在不同载体中的缓释情况,通过比较得出纳米颗粒包载因子在水凝胶中的释放比水凝胶直接作为缓释载体释放稳定,因子释放对骨髓间充质干细胞(BMSC)趋化作用显著。三维凝胶包埋BMSC后,CCK-8结果显示细胞活性保持在稳定状态;同时组织切片后HE染色表明包埋能够实现且细胞在材料内均匀分布。(4)探究了鸡胚绒毛尿囊血管模型的建立条件及在研究组织工程支架材料血管化评价中的初步应用。同时,本论文的研究也为解决组织工程血管化问题探究了从生长因子缓慢释放的角度促血管化的可能性。