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在肿瘤细胞和永生化细胞中,端粒酶介导的端粒延长与端粒结合蛋白1(TRFl)对端粒长度的负调控作用之间处于动态平衡,使端粒维持在一特定长度.近来发现一种新的端粒酶系统调控酶—端锚聚合酶1(Tankyrasel,TANKl),在细胞间期TANKl与TRFl结合共同定位于染色体末端,催化TRFl核糖基化而从端粒脱落,以便于端粒酶延伸端粒序列.该酶是调控端粒复制中最为明确的一环,是细胞癌变机制和癌症靶标研究的新热点.国外的研究现状为对TANKl结构及其细胞核内、外定位功能方面的探讨,少数学者报道了TANKl在某些恶性肿瘤中表达水平上调,并与hTERT(人端粒酶逆转录酶)的表达呈明显正相关.国内文献仅限于对该酶相关功能的综述性报道.国内、外罕见TANKl反义核酸作用于恶性肿瘤研究的相关文献报道.该课题旨在探讨TANKl反义寡核苷酸对人肺癌细胞系CALU增殖的影响.目的:探讨TANKl反义寡核苷酸对人肺癌细胞系CALU增殖的抑制情况,为肺癌基因治疗的靶标研究探索新途径.方法:设计合成TANKl正义寡核苷酸(TANKl-SODN)、反义寡核苷酸(TANKl-ASODN),待人肺癌细胞株CALU裸鼠蹊部皮下接种成瘤后,将成瘤裸鼠随机分成3组:对照组4只,正义组与反义组各5只.采用瘤体多位点注射的方法观察实体瘤的生长情况及肿瘤组织学、电镜癌细胞超微结构的改变;免疫组织化学SABC(链霉亲和素-生物素-酶复合物)法检测3组肺癌细胞中Ki67(细胞核增殖抗原)与hTERT蛋白的阳性表达水平;hTERT TSP原位杂交SABC染色系统检测3组癌细胞中hTERT mRNA的阳性表达情况.结论:1、人肺癌细胞系CALU中Ki67蛋白、hTERT蛋白及其mRNA呈高水平表达,TANKl与hTERT表达异常增加可能是癌细胞增殖活跃的重要原因,这几种基因的表达异常可能在肺癌发生及恶性进展过程中发挥重要作用.2、TANKl-ASODN对裸鼠体内的CALU肺癌细胞的增殖具有明显的抑制作用,可有效降低肺癌细胞中Ki67蛋白、hTERT蛋白及其mRNA的表达水平,使端粒酶活性明显下调,细胞增殖活性显著下降,瘤细胞大量衰老、死亡.3、肺癌细胞中TANKl、端粒酶与Ki67在反映细胞的增殖活性上可能存在着密切的联系,可联合应用来评价肺癌细胞的增殖活性及细胞分化程度,并作为预测肺癌预后的标准,为干预端粒酶系统治疗肺癌提供了新靶点.