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目的：骨肉瘤是最常见的原发性恶性骨肿瘤之一,其具有明显的软组织侵袭性以及高度远处转移倾向,临床早期诊断困难。本研究通过对骨肉瘤细胞系,骨肉瘤组织、正常骨组织及同一患者对应的术前血浆中RASSF1A基因甲基化的检测,加深对骨肉瘤发病分子机制的了解并探讨RASSF1A基因甲基化作为骨肉瘤临床诊断的分子标志物的可行性。方法：1.甲基化特异性PCR法检测骨肉瘤细胞系MG-63、 MNNG/HOSC1、Saos-2中RASSF1A基因启动子甲基化状况；2.甲基化特异性PCR法检测30例骨肉瘤患者血浆、肿瘤组织及15例健康志愿者骨组织和血浆中RASSF1A基因启动子甲基化状况；3.分析RASSF1A基因甲基化与患者性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤分化、肿瘤转移等临床病理特征的相关性。结果：1.骨肉瘤细胞系MG-63中未检测到RASSF1A基因甲基化,而MNNG/HOSC1和Saos-2细胞中检测到了RASSF1A基因甲基化。2.骨肉瘤组织中RASSF1A基因启动子甲基化阳性率为40%(12／30),同一患者血浆甲基化阳性率为26.7%(8／30)。12例肿瘤组织甲基化阳性患者其血浆甲基化阳性共8例,癌组织和血浆RASSF1A甲基化一致率为66.7%(8／12),18例癌组织甲基化阴性化者其血浆甲基化也为阴性。3.健康志愿者骨组织和血浆RASSF1A基因启动子甲基化阳性率均为0。骨肉瘤组织和正常骨组织RASSF1A基因启动子甲基化阳性率具有明显差异(p<0.05),骨肉瘤患者血浆和健康志愿者血浆RASSF1A基因启动子甲基化阳性率具有明显差异(p<0.05)。4.Kappa一致性检验显示骨肉瘤组织和血浆中RASSF1A甲基化水平具有一致性(Kappa值=0.133，p<0.05),骨肉瘤组织和血浆中RASSF1A基因甲基化水平与患者的性别、年龄、肿瘤位置无关(p>0.05),而与肿瘤的分化及有无远处转移有关(p<0.05)。结论：不同骨肉瘤细胞系中RASSF1A基因甲基化情况不一致。骨肉瘤患者血浆中RASSF1A基因启动子甲基化与骨肉瘤组织中变化具有一致性,可作为骨肉瘤患者临床诊断的一个辅助指标。图6幅,