论文部分内容阅读
目的:探讨自噬及PI3K-Akt通路在舒芬太尼后处理心肌缺血再灌注损伤保护中的作用。方法:选用雄性SD大鼠(220g-260g)35只,随机分为5组(n=7):假手术组(S组),心肌缺血再灌注损伤组(I/R组),舒芬太尼后处理组(SP组),舒芬太尼后处理+PI3K-Akt通路的抑制剂Wortmannin组(SP+W组),Wortmannin组(W组)。I/R组、SP组、SP+W组以及W组采用结扎冠脉左前降支(LAD)30min,再灌注120min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型。S组在冠脉左前降支(LAD)下穿线但不结扎。于再灌注前5min,I/R组由股静脉给予生理盐水1ml,SP组给予舒芬太尼(1μg/kg),SP+W组给予舒芬太尼(1μg/kg)及Wortmannin(15μg/kg),W组给予Wortmannin(15μg/kg)。再灌注120min时腹主动脉取血,检测血清CK-MB的浓度;处死大鼠后,取心尖组织,Western blot法检测Akt、磷酸化的Akt(p-Akt)、LC3-Ⅱ蛋白的表达;透射电镜下观察自噬小体的生成情况。结果:与S组比较,I/R组、SP组、SP+W组及W组血清CK-MB含量、心肌组织LC3-II蛋白、p-Akt表达增加、p-Akt/Akt升高,差异有统计学意义(P<0.05),自噬体数量增多;与I/R组比较,SP组血清CK-MB含量、心肌组织LC3-II蛋白表达减少、p-Akt表达增加、p-Akt/Akt升高,差异有统计学意义(P<0.05),自噬体数量减少;与SP组比较,SP+W组、W组血清CK-MB含量、心肌组织LC3-II蛋白表达增加、p-Akt表达降低、p-Akt/Akt降低,差异有统计学意义(P<0.05),自噬体数量增多。结论:1.舒芬太尼后处理可能通过抑制心肌细胞自噬而在心肌缺血再灌注损伤中起到保护作用;2.PI3K-Akt通路可能是主要调控位点之一。