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前言 炭疽是由炭疽杆菌（Bacillus Anthrax）感染引起的，炭疽杆菌在环境不适时能够形成芽胞，芽胞对冷、热、干燥、化学消毒剂的抵抗力极强。其实炭疽原为牛马羊等食草动物的疾病，这些动物在吃草时极易把土壤中的炭疽杆菌摄入口中，并在体内大量繁殖，导致其血液不能凝固，从口、鼻等腔道中流出，污染环境，人主要是通过直接或间接接触病畜或其皮毛而发病，因而炭疽属人畜共患急性传染病。 目前我国炭疽人间病例主要集中在西藏、甘肃、广西等10个高发地区。进入80年代，该病在我省一直处于低发状态，但是2001年我省共发生病人32例，病例涉及沈阳、盘锦、铁岭、朝阳、葫芦岛等市，发生2起暴发疫情，为此本文对辽宁省炭疽疫情尤其是2001年的疫情进行分析，以阐明其流行特征和流行因素，同时对疫区土壤的污染状况进行调查，并应用PCR方法对分离到的炭疽杆菌的毒力进行检测，以此来监测疫区终末消毒效果。 方法 1．流行病学调查研究方法： 1．1 采用描述流行病学方法，对全省炭疽病例的时间、地区、人群三间分布情况进行分析，阐明炭疽的流行特征。 1．2 采用暴发调查方法对2起暴发疫情进行调查分析，探究流行因素。 2．实验室研究方法： 2．1 采用传统的炭疽芽胞杆菌的分离及鉴定方法，对三次采集的34份土壤样品（其中未经任何消毒处理的土壤样品14份，经用漂白粉先后两次消毒的土壤样品各10份）进行检测，以确定疫区土壤中炭疽芽胞杆菌的污染。 2．2 应用PCR方法对分离菌株进行毒力检测。根据炭疽芽胞杆菌含有POX1、POX2两个质粒，任何一个质粒丢失，都会变为弱毒株的原理，我们设计了两对引物，即POX1上的LF及POX2上的Cap，进行毒力检测；DNA质粒的提取是按赛百胜试剂盒说明进行的;PCR扩增，经过95℃5‘55℃0‘72℃0‘l次，95℃l‘55℃l’72℃l‘30个循环，95℃1‘55℃l‘72℃6‘1次，产物10ul经1%琼脂糖凝胶电泳、EB染色、紫外线检测，877bp及IO89bp出现条带为强毒株，出现一条带为弱毒株，无条带为阴性。结果 1.辽宁省炭疽的流行特征 1.1据疫情资料记载，1950一2003年我省共发生炭疽病人1007例，高峰年分别为1955年，1963年、1965年，1971年、1973年，1980年，1991年，2001年。由此可见我省炭疽的流行周期为8一10年。 1.2 1981年一2003年我省炭疽病例时间分布主要集中在7、8月间，占病例总数的70.83%;年龄分布主要在25一55岁之间，占病例总数的70.83%;地区分布主要集中在沈阳、锦州、铁岭、朝阳、葫芦岛等地，农村发病居多;职业分布以农民为主，占发病总数的80;20%。由此可见，我省炭疽病例流行病学分型是以农业型为主。 1.3通过对2001年的32例炭疽病例调查表明，单纯皮肤型炭疽占90.62%，皮肤型炭疽同时伴肠型炭疽2例，合并脑膜炎1例，此3例均死亡。 1 .4调查2001年30例炭疽病例，都有与病死畜接触史，其中在接触中有明显皮肤破损史的占71.88%;未接触病死畜的同村人中无一人发病;单纯食肉者中无一人发病。 2.疫区土壤检测结果 2.1经用传统的细菌分离方法对第一次采集的14份土壤样品进行检测，其中在杀骡场地土壤样品中分离到1株芽胞杆菌，经一系列实验，鉴定为炭疽芽胞杆菌，其余土壤样品均为阴性。 2.2从先后两次消毒的土壤样品中共分离到4株炭疽杆菌。 2.35株菌PCR产物经用琼脂糖凝胶电泳检测，在877bP及1089bp处出现条带，表明菌株含有两个质粒，该5株菌均为强毒株，具有致病性。讨论1.国内报道本病的流行周期为8一ro年，季节和年龄分布情况主要是与人们暴露机会的多少有关，而且大多数病例都有与病死畜接触史，本文调查结果与上述情况相符。 有资料表明皮肤型炭疽最常见，约占炭疽病例总数的95%一99%，肠·型炭疽少见，但肠型炭疽、肺型炭疽病死率却可达90%以上。本次调查结果单纯皮肤型炭疽占90.62%，2例肠型炭疽均死亡，这一情况与全国研究结果相吻合。 2.动物感染炭疽以后，体内有大量的炭疽杆菌繁殖，导致其血液不能凝固，从病死动物的口鼻等腔道流出，污染环境。疫区土壤一旦受到污染，很难将其消除，动物在吃草时极易把土壤中的炭疽芽胞杆菌摄人口中，死后再次污染环境，造成恶性循环，潜在的危害性极大。 3.从消毒后的土壤中分离到炭疽杆菌，而且PCR检测表明该4株炭疽杆菌均具有毒力，表明漂白粉对炭疽疫区的消毒效果并不确定。由此可见，疫区终末消毒后必须对其消毒效果进行监测。 4.以前要证实从环境中分离到的炭疽杆菌是否具有毒力和致病性，是将分离菌株接种到实验动物，观察动物是否死亡，但是实验动物死后的尸体需进行消毒，如处理不当，存在再次污染环境的可能。因此，应用PCR技术检测炭疽杆菌的毒力不仅快速而且不污染环境，具有广泛的应用价值。结论 1.我省炭疽的流行周期为8一10年。目前我省炭疽病例以农业型为主，农民为高危人群，皮肤型炭疽最为常见，但肠型炭疽病死率极高，皮肤型炭疽的主要危险因素是剖杀