针灸对CTX化疗荷瘤小鼠脾脏组织中cAMP和cGMP含量影响的研究

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目的本课题使用健康雄性SPF级昆明(KM)小鼠建立荷瘤小鼠模型,继而腹腔注射环磷酰胺(CTX)150mg/kg,建立荷瘤小鼠化疗后免疫抑制模型。通过观察针灸前后对CTX化疗荷瘤小鼠脾脏组织内环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量的影响,探讨针灸对CTX化疗荷瘤小鼠免疫系统的影响,揭示针灸改善化疗后免疫抑制,提高机体免疫功能的作用机制。方法选取生长良好的S180肉瘤瘤源小鼠,根据5×106个瘤细胞/0.2mL/只的剂量分别在小鼠左腋下植瘤,5天后可在小鼠左腋下触及5-6mm大小肉瘤,标志着荷瘤小鼠模型成功。按照荷瘤小鼠体重随机分为荷瘤空白组、荷瘤模型组、荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组。荷瘤空白组腹腔注射同等剂量的0.9%生理盐水,其余3组荷瘤小鼠按150mg/kg腹腔注射CTX溶液,依据药代动力学注射后4h模型建立成功。在模型建立成功后同一时间段,荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组分别取“大椎”、“膈俞”、“肾俞”、“足三里”施以针刺、艾灸治疗,荷瘤空白组、荷瘤模型组陪同固定,每天在相同时间段进行治疗。针灸施治3天、5天后分别处死1批小鼠,取出完整脾脏,称重后匀浆。用ELISA检测法检测脾脏组织中cAMP和cGMP的含量。数据采用SPSS18.0forWindows统计分析软件进行分析。结果1施治3天后,与荷瘤模型组比较,荷瘤针刺组脾脏指数提升,但无显著性差异(P>0.05),荷瘤艾灸组脾脏指数提升,有显著性差异(P<0.05);与荷瘤针刺组比较,荷瘤艾灸组脾脏指数提升,但无显著性差异(P>0.05)。施治5天后,与荷瘤模型组比较,荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组脾脏指数均提升,均有显著性差异(P<0.05);与荷瘤针刺组比较,荷瘤艾灸组脾脏指数下降,但无显著性差异(P>0.05)。2施治3天后,与荷瘤模型组比较,荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组脾脏组织内cAMP含量增加,均有显著性差异(P<0.05);荷瘤针刺组较荷瘤艾灸组高,有显著性差异(P<0.05)。施治5天后,与荷瘤模型组比较,荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组脾脏组织内cAMP含量增加,均有显著性差异(P<0.05);荷瘤针刺组较荷瘤艾灸组高,有显著性差异(P<0.05)。3施治3天后,与荷瘤模型组比较,荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组脾脏组织内cGMP含量增加,均有显著性差异(P<0.05);荷瘤针刺组较荷瘤艾灸组高,有显著性差异(P<0.05)。施治5天后,与荷瘤模型组比较,荷瘤针刺组和荷瘤艾灸组脾脏组织内cGMP含量增加,均有显著性差异(P<0.05);荷瘤针刺组较荷瘤艾灸组高,有显著性差异(P<0.05)。4施治3天后,与荷瘤模型组比较,荷瘤针刺组cAMP/cGMP比值提升,有显著性差异(P<0.05),荷瘤艾灸组cAMP/cGMP比值提升,但无显著性差异(P>0.05);荷瘤针刺组与荷瘤艾灸组比,无显著性差异(P>0.05)。施治5天后,与荷瘤模型组比较,荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组cAMP/cGMP比值提升,均有显著性差异(P<0.05);荷瘤针刺组与荷瘤艾灸组比,无显著性差异(P>0.05)。结论1针灸可以提升CTX化疗荷瘤小鼠的脾脏指数,能够减轻CTX化疗荷瘤小鼠免疫器官脾脏的损伤,提高CTX化疗荷瘤小鼠的免疫功能。2CTX导致荷瘤小鼠脾脏组织中cAMP含量的下降,针刺和艾灸可以提高化疗荷瘤小鼠脾脏组织中cAMP的含量,淋巴细胞转化率随着cAMP含量增加而上升,通过提高cAMP的含量能够抑制细胞增殖,使细胞DNA复制、细胞分裂、细胞生长减缓;促进细胞分化,使细胞内的DNA转录生成InRNA,进一步合成专一性的蛋白质,最终使细胞形态、结构、生化组成和功能增多;进而改善机体的免疫功能。3CTX导致荷瘤小鼠脾脏组织中cGMP含量的下降,针刺和艾灸可以提高化疗荷瘤小鼠脾脏组织中cGMP的含量,cGMP含量增加与细胞失控增殖的生长特性一致,cGMP含量增加能够能诱导DNA含量的增加,促进细胞的有丝分裂;进而抑制细胞分化,促进细胞增殖,引导调节机体的免疫功能。4CTX导致荷瘤小鼠脾脏组织中cAMP/cGMP的比值减小,针刺和艾灸可以提升化疗荷瘤小鼠脾脏组织中cAMP/cGMP的比值,cAMP/cGMP的比值上升,机体免疫应答能力增强,cAMP/cGMP的比值改变是机体免疫抑制的反应途径之一。
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