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目的:烟草烟雾暴露下建立小鼠肺气肿模型,观察调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)中组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)活性对Treg/Th17细胞的平衡变化,探讨吸烟导致肺气肿中存在CD4~+T细胞亚群之间相互失衡的机制。方法:将健康雄性8周龄Balb/c小鼠按照随机数字法分为对照组、烟熏组,每组各30只,对照组暴露于新鲜空气中自然喂养24周,烟熏组用香烟烟雾暴露24周建立小鼠肺气肿模型。(1)苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肺组织形态学的改变,计算两组肺泡平均内衬间隔(Mean linear intercepts,MLI)。(2)流式细胞术检测小鼠外周血、脾脏和肺组织中CD4~+、CD4~+IL-17、CD4~+IFN-γ、CD4~+Foxp3~+细胞的表达。(3)采用免疫磁珠法分选肺组织中Treg细胞,实时荧光定量PCR法(Real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测两组小鼠肺组织Treg中IL-10 mRNA、TGF-βmRNA、FoxP3 mRNA及GITR mRNA相对表达量。(4)检测小鼠肺组织Treg细胞中组蛋白乙酰化酶(histone acetyltransferases,HAT)和组蛋白去乙酰化酶(histone Deacetylase,HDAC)的活性。(5)采用相关性分析法,分析小鼠肺组织Treg细胞中HDAC活性与TGF-β、FoxP3及GITR表达的相关性。结果:(1)小鼠肺组织形态学观察:对照组小鼠肺泡结构正常,气道上皮细胞排列整齐,烟熏组小鼠肺泡腔扩大,肺泡壁断裂,部分融合为肺大泡,细胞排列紊乱且可见炎症细胞浸润;烟熏组的MLI为(53.1±8.7)μm,明显高于对照组的(28.2±1.2)μm,差异有统计学意义(P<0.01),小鼠肺气肿模型成立。(2)小鼠外周血、脾脏和肺组织中CD4~+IL-17、CD4~+IFN-γ、CD4~+、CD4~+Foxp3~+细胞的表达:与对照组比较,烟熏组CD4~+Foxp3~+细胞表达比例明显升高,CD4~+IL-17、CD4~+IFN-γ的比例也明显上升,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)实时荧光定量PCR结果显示:与对照组比较,烟熏组肺组织Treg细胞中IL-10mRNA、FoxP3 mRNA及GITR mRNA的表达比例明显升高、TGF-βmRNA的表达比例下降,差异均有统计学意义(P<0.05);(4)小鼠肺组织Treg细胞中HAT、HDAC活性检测:与对照组比较,烟熏组肺组织Treg细胞中HDAC活性降低,差异均有统计学意义(P<0.05),HAT活性的表达无变化。(5)相关性分析:小鼠肺组织Treg细胞中HDAC活性与TGF-β的表达呈正相关(γ=0.70,P<0.05),与FoxP3、GITR的表达呈负相关(γ=-0.23、γ=-0.43,P<0.05)。结论:烟草烟雾暴露小鼠肺气肿模型中,肺组织中Treg细胞分泌抗炎因子IL-10增强的同时向Th17细胞分化减弱,而这一作用可能与Treg细胞中组蛋白去乙酰化酶活性降低后导致Treg细胞分泌的TGF-β表达减少有关。