叶酸修饰胡桃醌自微乳的制备与靶向性研究

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胡桃醌属于萘醌类的一种,主要存在于胡桃科植物胡桃以及其同一属植物黑核桃中,抗肿瘤的效果极其突出。胡桃醌一般用于抗肿瘤的治疗,有研究显示:胡桃醌能够强效抑制恶性肿瘤细胞,其抑瘤机制是通过抑制脱氧核糖核苷酸的合成,让线粒体空泡化和堵塞钾离子通道等方式抑制癌细胞。但是因为胡桃醌自身的水溶性较差,导致其生物利用度较低。而自微乳是近年来发展起来的新型药物载体,实验显示,如果将醌类药物制成自微乳之后能够提高药物的溶解度、稳定性,半衰期就会明显增加,药物的治疗效果将会明显增强。目前有关胡桃醌自微乳类药物制剂方面的研究未曾报道。本课题将胡桃醌制成叶酸修饰的自微乳,比较了胡桃醌混悬液、自微乳和叶酸修饰自微乳等三种制剂的靶向性。叶酸修饰胡桃醌自微乳在延长体内循环时间的同时,借助于叶酸与受体特异性结合增强其对肿瘤细胞的靶向作用。将胡桃醌制成普通自微乳。本研究主要通过伪三元相图筛选乳化剂、助乳化剂及油相,以载药量、粒径和PDI为评价指标,通过单因素考察优化处方与工艺。最佳处方工艺为:取 CremophorEL35g,TranscutolHP40g,油酸乙酯 25g,在 37 ℃、400r/min 磁力搅拌3min的方法制备空白自微乳,加入胡桃醌0.75g,磁力搅拌使之溶解,得到胡桃醌自微乳。将胡桃醌制成叶酸修饰的自微乳。先采用顺序加样法制备FA-PEG-CHEMS,通过核磁共振氢谱确定FA-PEG-CHEMS的结构。单因素考察处方中FA-PEG-CHEMS的用量,以粒径、PDI为评价指标,最终确定FA-PEG-CHEMS的用量与乳化剂用量的比值为3:100。用最好的处方工艺重复测定三次,测得的平均粒径为41nm,平均PDI为0.263。抗肿瘤靶向性研究,采用MTT法比较胡桃醌混悬液、普通胡桃醌自微乳以及叶酸修饰胡桃醌自微乳对人胃癌SGC-7901细胞不同时间的细胞抑制率。结果表明,叶酸修饰的胡桃醌自微乳与普通自微乳相比对人胃癌SGC-7901细胞表现出更持久和更强的抑制作用。S-180荷瘤小鼠体内组织分布研究,采用HPLC测定不同组织胡桃醌的含量,比较上述三种制剂中胡桃醌在荷瘤小鼠各个组织(包括心、肝、脾、肺、肾以及肿瘤)的相对分布率。比较三个不同时间点(0.25h、1h、4h)三种制剂中胡桃醌在S-180荷瘤小鼠体内的分布情况,结果显示,叶酸修饰胡桃醌自微乳肿瘤靶向性显著。
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