基于园林废弃物堆腐的纤维素降解菌筛选及其应用研究

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面对园林废弃物逐年增加的问题,如何有效的利用园林废弃物已成为研究人员重点关注的研究内容,其中利用外源菌特别是纤维素降解菌进行堆腐是其中的研究热点。为此,本论文主要通过分离园林废弃物堆腐过程的纤维素降解菌,再将其运用于园林废弃物堆腐研究,并探讨园林废弃物堆腐产品作为草花栽培基质的可能性。主要研究结果如下:1.采用平板稀释法结合形态观察和细菌16S r DNA、真菌r DNA ITS测序分离鉴定园林废弃物堆腐过程中的有效菌,结果分离得到22种细菌,21种真菌。其中,细菌以芽孢杆菌属(Bacillus)的种类居多;真菌种类较分散但多集中于曲霉属(Aspergillus)。进一步通过羧甲基纤维素钠-刚果红染色法对已确定种类的细菌和真菌进行产纤维素酶能力的测定,共鉴定出13种细菌和18种真菌具有纤维素降解能力。通过酶相对活性大小的比较发现2种细菌和2种真菌的的纤维素降解能力较强,分别是细菌中芽孢杆菌属的Bacillus stratosphericus(D/d=3.43)、Bacillus thuringiensis(D/d=4.53)和真菌中曲霉属的Aspergillus carneu(D/d=2.64)、奥德蘑属(Oudemansiella)的Oudemansiella canarii(D/d=7.67)。2.通过将分离的31株纤维素降解菌制成混合菌并以不添加外源菌及添加EM菌为对照研究其在园林废弃物堆腐的作用,结果表明:混合菌能提高园林废弃物堆腐产品的质量,堆腐后的产品呈暗褐色且具有泥土气味,符合腐熟指标;能提高园林废弃物堆腐过程的温度,能维持较高的温度5 d(50℃~54℃),有效杀灭病原菌,使堆腐产品达到无害化标准;还能降低园林废弃物堆腐过程中铵态氮的含量,提高硝态氮含量,促使堆体p H值升高,EC值降低;同时该处理的种子发芽指数高于其他2组,其GI值于第14 d达到80%以上,达到基本腐熟程度;与对照及EM菌处理相比,混合菌处理的堆腐后全氮含量(12.27 g/kg)高于对照及EM菌处理(11.83 g/kg、11.26 g/kg),起到保氮的作用,减少堆腐过程中的氮素损失,还能提高堆腐产品的养分含量,其中有效氮、有效磷、有效钾含量较堆腐前分别增加了26.3%、29.0%、20.0%,明显高于另外2个处理。3.以非洲凤仙(Impatiens wallerana)和矮牵牛(Petunia hybrida)为花材,研究这2种草花在3种园林废弃物堆腐产品以不同比例与栽培土组成的基质上的生长情况,以期筛选出堆腐产品代替泥炭作为基质的最佳配方。结果表明,园林废弃物堆腐产品以不同比例与栽培土组成的基质理化性质较好,能为植物生长提供稳定、缓冲性强、利于根系生长的环境条件,且基质养分较高,是较为理想的花卉栽培基质。而添加菌剂堆腐处理的产品组成的基质有利于2种草花的生长,均能提高植株的株高和冠幅,促进叶片生长并增加叶绿素含量,并且促进花枝的分蘖,从而提高植株干鲜重和开花数量。采用隶属函数法分析发现最适合非洲凤仙生长的基质为处理H,即纯混合菌堆腐处理的产品组成的基质栽培的非洲凤仙品质最高,其函数值达到0.75,而由其与栽培土以比例组成的基质也适合非洲凤仙生长,其中处理3H为0.74,处理7H为0.74。最适合矮牵牛生长的基质为处理3H,即混合菌堆腐处理的产品与栽培土以3:7比例混合成的基质,其函数值达到0.95,单纯堆腐产品组成的基质不利于矮牵牛生长。说明混合菌堆腐处理的产品可以代替泥炭作为这2种草花的基质,由其组成的基质2种草花的生长状况优于EM菌堆腐处理的产品和不添加菌剂堆腐处理的产品。结论:本研究分离鉴定出来的纤维素降解菌对园林废弃物堆腐具有高效的降解效率,且其堆腐产品作为花卉栽培基质是可行的。
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