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这几年来,与维氏气单胞菌感染水生动物的有关报道数见不鲜,对水产养殖造成了惨重的经济损失。当今对该细菌引起的疾病,大多都选取化学药物进行预防或治疗。相比之下,细菌灭活疫苗绿色、安全、操作简单且成本低。灭活疫苗与佐剂配伍使用,有利于机体接连不断地产生特异性的抗体,提升水产动物对外来病原菌侵袭机体的抵御能力。鉴于国内针对维氏气单胞菌灭活疫苗的研究尚未成熟,本研究将己鉴定的维氏气单胞菌制成灭活疫苗,并提取鞭毛蛋白,同时选择氢氧化铝凝胶、葡聚糖和黄芪多糖一同作为免疫佐剂,设立铝胶佐剂一组为佐剂对照组,其余三种佐剂分别设立三个不同的浓度梯度,分与灭活疫苗配伍免疫鲫鱼后,筛选出最适宜的佐剂及浓度。起初,对菌液的灭活条件进行探究,确定0.1%甲醛,4℃下作用12h为最适宜的灭活条件。而后提取维氏气单胞菌鞭毛蛋白,利用SDS-PAGE电泳检测其条带并标定浓度。分别设立含有鞭毛蛋白30%、40%、50%,含有黄芪多糖30%、40%、50%,含有葡聚糖30%、40%、50%不同浓度的灭活疫苗实验组,同时设立一个空白对照组、一个无佐剂灭活疫苗实验组和一个铝胶佐剂对照组。经过空养观察后,与饲喂的第7天,第21天,第35天进行腹腔注射免疫鲫鱼,在免疫后的两天内,随机挑选鲫鱼进行采血和采组织。部分血液加入抗凝剂制备成抗凝血用作白细胞吞噬实验,其余制备成血清,用于血清指标检测;结果发现,所有实验组血清中都能产生高水平的IgM抗体含量,同时血清中ACP、AKP、SOD、LZM活性均呈上升趋势,采取心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织后,提取RNA后通过荧光定量PCR技术,检测不同组织中的IL-10、IL-1β、IFN-γ及TNF-α基因的转录水平,证实了佐剂的添加可以促进机体的炎症反应。此外,各实验组鲫鱼体内的IL-10、IL-1β、IFN-γ及TNF-α免疫基因的表达量呈上调趋势,表明佐剂的添加可以增强鲫鱼免疫反应水平。通过白细胞吞噬实验及免疫保护率的计算,进一步验证了各实验组对于鲫鱼免疫力的增强能力。最后,总结出了50%鞭毛蛋白佐剂含量的鲫鱼整体免疫能力最强,30%黄芪多糖佐剂含量的鲫鱼免疫能力略次之,40%葡聚糖佐剂和铝胶佐剂在指标反应上互有上下,难分伯仲,但略低于前两者。