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高血压是脑中风、冠心病、心肌梗塞和糖尿病等心血管疾病的风险因子,该疾病已经成为最常见的危险性疾病之一。目前,临床上常用的一些降血压药物虽然具有很强的降血压作用,但同时也会产生一定的副作用,比如过敏、皮疹、咳嗽、味觉异常、白细胞减少以及具有药物依赖性等。然而,食源性ACEI肽是一种极具开发潜力的多肽类物质,它不仅具有降血压活性,而且安全性高、无其他毒副作用,已经成为生物活性肽领域研究的热点之一。罗非鱼皮明胶经蛋白酶水解后即可获得安全性高、低毒副作用的具有降低血压的小分子多肽。本文以罗非鱼的副产物罗非鱼皮为研究对象,利用蛋白酶水解鱼皮明胶制备ACEI肽,并对明胶水解产物进行了初步分离纯化、结构鉴定,获得了ACEI活性较高的小分子多肽。主要研究结果如下:1.以罗非鱼皮为原料,利用两种蛋白酶对其进行水解,将水解得到的明胶水解产物再经过连续模拟胃肠消化,并测定各个消化阶段产物的水解度及ACEI活性。同时,考虑体外肠吸收的影响,采用Caco-2细胞单层模型制备得到ACEI肽。再通过Sephadex G-25凝胶过滤柱、反向高效液相色谱对其进行分离纯化,经过高分辨质谱鉴定得到VGLPNSR和QAGLSPVR两种新型ACEI肽,其分子量分别为741.4133Da和826.4661Da。2.将鉴定得到的两种新型ACEI肽进行化学合成用于其体外和体内降血压活性的研究。以不同浓度的ACEI肽溶液与固定浓度底物HHL的反应来进行VGLPNSR和QAGLSPVR的体外ACEI活性的测定。测定得到VGLPNSR和QAGLSPVR的回归方程分别为:y=26.30ln（x）-65.56（R2=0.9919）和y=26.40ln（x）-61.53（R2=0.977）,并根据回归方程计算得到其IC50值分别为80.90和68.35μM。通过原发性高血压（SHR）大鼠模型研究了VGLPNSR和QAGLSPVR的体内降压活性,以卡托普利为阳性对照,分别测定了给药前后SHR大鼠的收缩压（SBP）和舒张压（DBP）。研究结果表明,二者均能显著降低SHR大鼠的SBP和DBP,且都在给药3小时后达到降压幅度最大值。3.运用酶动力学Lineweaver-Burk图模型来判断新型ACEI肽VGLPNSR和QAGLSPVR的抑制作用类型,并结合分子对接软件SYBYL-X 2.1.1研究ACEI肽与ACE酶之间的结构活性关系。实验结果发现,本研究鉴定的两种ACEI肽的均为非竞争性抑制剂。对接模拟结果表明,VGLPNSR与Ser526,Asp415,Gly386,Ile388,Val380和Gln369氨基酸残基发生氢键相互作用,QAGLSPVR与Asp465,Asp415,Val380和His410氨基酸残基发生氢键相互作用。二者均没有与ACE活性位点中的关键氨基酸残基相互作用。即两种关键肽和ACE之间的相互作用是非竞争性的,与酶动力学的测定结果相同。