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目的：临床流行病学研究显示，胰岛素抵抗综合征（IRS）患者发生心脑血管疾病明显高于普通人群。IRS是包括肥胖、高血压、糖耐量减低、2型糖尿病、脂代谢紊乱、纤溶活性异常等在内的全身代谢紊乱，内皮细胞功能异常也是IRS的一个重要组成部分。已经证实，在肥胖、糖耐量减低、2型糖尿病患者血浆中游离脂肪酸（free fatty acid,FFA）水平明显升高。因此，高FFA血症在IRS大血管病变发生发展中的作用备受关注。本课题通过研究不同种类及不同浓度水平的FFA对离体培养的人脐静脉血管内皮细胞合成一氧化氮（NO）及内皮素（ET）的影响，以探讨FFA水平升高致血管内皮细胞功能改变的机制，为IRS大血管病变的防治提供依据。方法：1.在Jaffe法的基础上加以改进，建立了人脐静脉血管内皮细胞原代培养的方法。2.将2－3代离体培养人脐静脉血管内皮细胞种入24孔细胞培养板，分为C16:0、C18:0、C18:1、C18:2、C24:0及对照六组，每FFA组选用4个浓度，用含相应游离脂肪酸及不含游离脂肪酸的培养基孵育24小时。硝酸还原酶法测培养基中一氧化氮，放免法测内皮素。结果：1.根据形态学观察及Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测，所培养的细胞是血管内皮细胞，1-3代细胞生长旺<WP=4>盛，符合实验要求。2.不同FFA对血管内皮细胞合成NO的影响：C18:1、C18:2组当FFA浓度到200 umol/L及以上时，培养基中NO浓度低于对照组，差异有显著性（P<0.01）。C16:0 、C18:0及C24:0组与对照组比较无显著差异（P均＞0.05）。C18:1各浓度组分别与C18:2各浓度组比较，差异无显著性（P均＞0.05）。3. 不同FFA对血管内皮细胞合成ET的影响：与对照组比较，C18:1、C18:2各浓度组培养基中ET浓度低于对照组，差异有显著性（P<0.01）。C16:0、C18:0及C24:0从200umol/L组起，培养基中ET浓度高于对照组，差异有显著性（P<0.01）。C18:2各浓度组ET值低于C18:1各浓度组ET值，差异有显著性（P<0.01）。C18:1各浓度组ET值从平均值上看依次降低，方差分析组间比较显示各浓度组差异有显著性（P<0.01），两两比较q检验显示随FFA浓度升高各组ET值降低有显著性。C18:2各浓度组间比较，方差分析显不同浓度组差异有显著性（P<0.01），两两比较q检验显示随FFA浓度升高各组ET值降低有显著性。C16:0各浓度组ET值从平均值上看依次升高，方差分析组间比较显示各浓度组差异有显著性（P<0.01），两两比较q检验显示随FFA浓度升高各组ET值升高有显著性。C18:0各浓度组方差分析组间比较显示各组差异有显著性（P<0.01），两两比较q检验显示随FFA浓度升高各组ET值升高有显著性。C24:0各浓度组方差分析组间比较显示各组差异有显著性（P<0.01），两两比较q检验显<WP=5>示随FFA浓度升高各组ET值升高有显著性。将C18:0、C18:1、C18:2各相同浓度组ET比值分别做两两比较，依次降低有显著意义（P<0.01）。将C16:0、C18:0 、C24:0各相同浓度组进行组间比较无显著差异（P＞0.05）。4.不同FFA对血管内皮细胞NO/ET比值的影响：与对照组比较，C18:1、C18:2各浓度组NO/ET比值高于对照组，差异有显著性（P<0.01）。C16:0、C18:0、C24:0从200umol/L组起各浓度组NO/ET比值低于对照组，差异有显著性（P<0.01或P<0.05）。C18:2各浓度组NO/ET比值高于C18:1各浓度组NO/ET比值，差异有显著性（P<0.01）。C18:1各浓度组NO/ET比值从平均值上看依次升高，方差分析组间比较显示各浓度组差异有显著性（P<0.01），两两比较q检验显示随FFA浓度升高各组NO/ET值升高有显著性。C18:2各浓度组间比较，方差分析显不同浓度组差异有显著性（P<0.01），两两比较q检验显示随FFA浓度升高各组NO/ET值升高有显著性。将C18:0、C18:1、C18:2各相同浓度组NO/ET比值分别做两两比较，依次升高有显著意义（P<0.01）。将C16:0、C18:0 、C24:0各相同浓度组进行组间比较无显著差异（P＞0.05）。结论：1.在Jaffe法的基础上加以改进的人脐静脉血管内皮细胞原代培养的方法所培养的细胞符合实验要求。2.FFA对内皮细胞合成NO的影响与链长无关。3.不饱和脂肪酸C18:1、C18:2抑制内皮细胞合成NO,<WP=6>但同时C18:1、C18:2呈浓度依赖性抑制内皮细胞合成ET，从NO/ET比值上反映出它们对ET的抑制作用强于对NO的抑制作用，说明不饱和脂肪酸C18:1、C18:2对内皮细胞的综合效应是起保护作用。4.饱和脂肪酸C16:0、C18:0、C24:0呈浓度依赖性促进内皮细胞合成ET，是FFA抑制血管舒张性的可能因素。但作用程度与链长无关。5.FFA对内皮细胞的作用与饱和度有关。提示饮食中可适当降低SFA，增加PUFA，对血管内皮细胞功能具有保护作用。6.FFA对内皮细胞合成ET的影响提示ETA受体拮抗剂是高FFA水平并发心血管疾病人群的正确治疗方向。