福氏2a痢疾杆菌毒力相关基因的研究

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全面鉴定痢疾杆菌毒力基因将有助于人们对该病原菌的分子致病机制有更加深入的认识,为控制和预防该病的发生提供更多手段和途径。本文用体内表达技术获得了痢疾杆菌福氏2a可能与其毒力相关的基因,包括yphF、wcaJ、dam、alkA、cysG、yaiC、IS600,citC、aroD、CPO198等,通过构建相应基因的突变体,研究二者之间的关系。首先,我们用λ噬菌体的Red重组系统初步建立了一套快速敲除痢疾杆菌基因的技术平台,通过一系列的实验成功地敲除了痢疾杆菌alkA基因。但此方法首次在痢疾杆菌中的应用,技术还不够完善。为了加快实验进度,顺利结束本工作,我们用本实验室十分成熟的利用宿主本身的RecA重组系统构建突变体的方法,对相应基因进行了研究。构建了yphF、wcaJ、dam、alkA、cysG、yaiC、IS600、citC、aroD、cpo198基因的插入突变体。进而进行Hela细胞侵袭实验和小鼠肺感染实验分析细菌竞争性指数。获得数据显示多数基因失活后,其竞争性指数较低,侵袭能力下降,毒性减弱。这些基因可能与福氏2a痢疾杆菌的毒力相关。
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