热带牧草真菌病害调查、病原鉴定及基础生物学特性研究

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热带牧草是我国草业的重要组成部分,是发展热带畜牧业的物质基础。我国热带地区高温高湿的气候条件,一方面十分有利于热带牧草生长,另一方面也给植物病原微生物的生长和繁殖提供了有利条件,导致牧草病害的发生和流行,造成严重损失。牧草病害已成为当前草业生产的主要限制因素之一。本研究于2014~2015年对云南、广西、广东和海南4个省份的34种主要热带牧草上真菌病害的发生情况进行了病害调查,在对病原分离物进行形态学观察基础上,结合分子生物学的方法进行了病原鉴定,重点对危害较严重的热带禾本科牧草重要病原真菌进行了生物学特性测定和杀菌剂的室内毒力测定。结果如下:1.通过调查发现了 34种主要热带牧草上的66种真菌病害。所分离得到的致病菌株主要涉及10个属,分别为:炭疽菌属(Colletotrichum sp.)、镰刀菌属(Fusariurr sp.)、凸脐蠕孢属(Exserohilum sp.)、黑孢霉属(Nigrospora sp.)、茎点霉属(Phoma sp.)、棒孢属(Corynesporasp.)、弯孢属(Curvularia sp.)、尾孢属(Cercosporasp.)、链格孢属(Alternariasp.)以及柄锈菌属(Puccinia sp.);并对病原菌的种属分类和危害的严重程度进行了归纳总结。2.针对引起热研4号王草、桂牧1号杂交象草等禾本科牧草叶斑病的6种病原真菌的生物学特性分析表明,大部分病原真菌对环境条件有较强的适应性,对温度、酸碱度的适应范围较广,且能利用多种碳氮源。具体而言,①适宜草茎点霉菌丝体生长的温度范围为25~32℃,最适温度为25℃,菌丝体的致死温度为50℃,10 min;最适宜菌丝体生长的pH为5~8;菌丝体在含有葡萄糖、蔗糖和甘露醇的查氏培养基上生长良好,乳糖不适宜菌丝体生长,菌丝体生长的最适氮源为蛋白胨,而尿素则不利于菌丝体生长。②适宜尖孢镰刀菌菌丝体生长的温度范围为25~32℃,最适温度为28℃,菌丝体的致死温度为60℃,10 min;菌丝体生长的最适pH为9~11;最适宜菌丝体生长的碳源为麦芽糖,乳糖不利于菌丝体生长;蛋白胨是菌丝体生长的最佳氮源,天冬酰胺和尿素不利于菌丝体的生长。③适宜球黑孢菌菌丝体生长的温度范围为20~28℃,最适温度为25℃,菌丝体的致死温度为50℃,10 min;菌丝体生长的最适pH为5~8;麦芽糖和蔗糖是适宜菌丝体生长的碳源但菌丝体生长无法利用乳糖;菌丝体生长的最适氮源是蛋白胨和牛肉浸膏,天冬酰胺、尿素和甘氨酸不利于菌丝体生长。④适宜弯孢菌菌丝体生长的温度范围为25~32℃,最适温度为32℃,菌丝体的致死温度为60℃,10 min;菌丝体生长的最适pH为6~8;菌丝体生长的最适碳源为麦芽糖、蔗糖和甘露醇;乳糖不利于菌丝体生长;该菌在含有不同氮源的查氏培养基上生长状况存在较大差异,在含有牛肉浸膏和蛋白胨的查氏培养基上生长较快,在含有尿素的查氏培养基上生长最慢。⑤适宜嘴突凸脐蠕孢菌丝体生长的温度为25~32℃,最适温度为28~32℃,菌丝体的致死温度为60℃,10 min;最适宜菌丝体生长的pH为6~8;该菌对大部分碳源的利用效率较好,仅在含有甘露醇的查氏培养基上生长受到抑制;菌丝体生长的最佳氮源为硝酸钠,尿素不利于菌丝体生长。⑥适宜链格孢菌丝体生长的温度为28~32℃,最适温度为32℃,菌丝体的致死温度为55℃,10min;菌丝体生长的最适pH为6~9;适宜菌丝体生长的碳源有麦芽糖、葡萄糖和蔗糖,果糖不利于菌丝体生长;菌丝体在含有不同氮源的培养基上生长状况差异较大,在含有牛肉浸膏和硝酸钠的培养基上生长较快,以蛋白胨、天冬酰胺和甘氨酸为氮源时生长较慢,在含有尿素的培养基上无法生长。3.11种杀菌剂对6种病原真菌的室内毒力测定结果表明,戊唑醇对所有6种供试病原菌均有较强的毒力,且供试病原菌对戊唑醇都比较敏感。而腈菌唑对除了黑孢霉以外的其它五种供试病原菌也都具有较强的毒力;多菌灵对嘴突凸脐蠕孢毒力较弱且嘴突凸脐蠕孢对其不敏感,但对其它5种供试病原菌均有较好的毒力。在11种供试杀菌剂中,异菌脲的抑菌效果最差,除了对链格孢菌有一定的毒力之外,对其余5种供试病原菌则几乎没有抑菌效果。
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