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肿瘤免疫治疗是利用患者自身免疫系统对抗肿瘤细胞的一种新型治疗策略。过继转移记忆T细胞在临床上有较好的疗效。因此,了解CD8~+T细胞产生记忆的分子机制尤为重要。本研究的目的是探讨抑制mTORC2/AKT通路对CD8~+T细胞记忆形成的影响,并探讨代谢调节和表观遗传学的变化。在实验过程中,采用OT-1小鼠脾脏细胞进行体外活化、增殖,同时加入AKT抑制剂MK-2206(终浓度为1μM)或DMSO对细胞进行处理,体外培养3天后,利用流式细胞术检测表面活化分子和转录因子的表达情况;收集细胞沉淀,进行ATAC-seq和CHIP-seq。体外培养4天后,利用流式细胞术检测线粒体相关指标和细胞因子的表达情况;收集细胞沉淀,抽提RNA、核蛋白和胞浆蛋白,使用荧光定量PCR检测记忆形成相关、效应功能相关和代谢相关基因的相对表达量,利用Western Blot技术检测糖异生和线粒体合成相关蛋白表达情况。流式细胞术检测结果表明,MK-2206体外处理小鼠脾细胞,抑制CD8~+T细胞表面活化分子和细胞因子的表达,上调CD62L和Tcf1的表达,增强Mito SOX和TMRE荧光信号。荧光定量PCR结果表明,MK-2206处理增加了PCK1、Pygl和Pygm基因的相对表达。ATAC-seq与CHIP-seq结果显示,MK-2206处理导致大量基因的可及性增加,并且实验组和对照组中均出现了大量H3K4me3而非H3K27ac修饰。综上所述,通过抑制mTORC2/AKT途径,可以起到增强CD8~+T细胞记忆形成的作用,进而在一定程度上抑制CD8~+T细胞的活化和效应功能。此外,代谢以及表观遗传学检测结果显示,抑制mTORC2/AKT途径增加线粒体膜电位、ROS水平及细胞糖异生水平;CD8~+T细胞内伴随着H3K4me3修饰的染色质可及性的剧烈变化。因此,抑制mTORC2/AKT途径提高CD8~+T细胞记忆性,为过继免疫细胞疗法提供了治疗靶点,代谢与表观遗传学的改变也更好的揭示了CD8~+T细胞记忆形成的分子机制,在肿瘤免疫治疗的研究中具有一定的实用价值。