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目的:1.学习和掌握建立兔耳增生性瘢痕模型的方法。2.确定己酮可可碱治疗兔耳增生性瘢痕的最适浓度。3.在最适浓度下,观察己酮可可碱对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。 方法:1.日本大耳白兔外固定、麻醉、备皮、消毒,在兔的双耳腹侧中段分别做6个边长为1cm的正方形切口,完整切除全层皮肤,每天换药,待其生长,建立兔耳增生性瘢痕模型。2.分别配制浓度为0.1g/L、0.5g/L、1g/L、2g/L、3g/L、4g/L、8g/L、16g/L的己酮可可碱溶液,并在兔耳瘢痕内注射,注射后4周,取瘢痕做苏木精-伊红染色,在普通光学显微镜下(HE×400),3人分别对所有的切片中的成纤维细胞计数,每人每张切片随机取3个视野,结果取平均数。据成纤维细胞数确定己酮可可碱的最适治疗浓度。3.在兔耳增生性瘢痕内注射最适浓度的己酮可可碱,分别于用药后2、4、6周取材染色,据成纤维细胞数研究己酮可可碱对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。4.数据结果以均数±标准差(x±s)表示,用EXCEL建立数据库,SPSS17.0统计软件分析。所有实验组间差异用t检验。P<0.05有统计学意义,P>0.05无统计学意义。 结果:1.浓度为1g/L的己酮可可碱溶液组的成纤维细胞计数为117.17±35.39个,数量少于其他浓度组,与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.05),1g/L为己酮可可碱抑制兔耳增生性瘢痕成纤维细胞的最适浓度。2.用药后2周,曲安奈德组与实验组成纤维细胞计数相比,差异无统计学意义(t=-0.08,P>0.05)。用药后4周和6周,两组成纤维细胞计数均减少,差异有统计学意义(P<0.05)。3.蒸馏水组与实验组相比,用药后2、4、6周,成纤维细胞计数均有统计学意义(P<0.05),己酮可可碱可抑制成纤维细胞增殖。 结论:1.成功建立兔耳增生性瘢痕模型,成功率约92.9%,高于现有文献报道的成功率。2.己酮可可碱可有效治疗兔耳增生性瘢痕,其最适浓度为1g/L。3.局部注射己酮可可碱可以抑制成纤维细胞增殖,可以有效抑制兔耳增生性瘢痕的生长。4.己酮可可碱价格低廉,易于获取,且在体外培养的成纤维细胞和动物模型上均获得了较好的实验结果,提示其是一个非常有应用前景的病理性瘢痕治疗药物,也为探索相关疾病的发病机理上提供了一个非常好的机会。