【摘 要】
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水稻是最重要的粮食作物之一。然而,淡水资源的匮乏和极端气候引起的干旱极大地限制了水稻的稳产。因此,培育具有较强抗旱性的品种意义重大。发掘鉴定抗旱相关基因,研究其抗旱机制,将有助于抗旱优良基因在水稻遗传改良中的应用。水稻蜡质合成及抗旱相关基因DWA1编码一个包含三个主要酶样结构域的巨型蛋白,而每个结构域都能对应一种独立的酶。这些结构域包括氧化还原酶样结构域(Redox domain)、含有AMP结合
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水稻是最重要的粮食作物之一。然而,淡水资源的匮乏和极端气候引起的干旱极大地限制了水稻的稳产。因此,培育具有较强抗旱性的品种意义重大。发掘鉴定抗旱相关基因,研究其抗旱机制,将有助于抗旱优良基因在水稻遗传改良中的应用。水稻蜡质合成及抗旱相关基因DWA1编码一个包含三个主要酶样结构域的巨型蛋白,而每个结构域都能对应一种独立的酶。这些结构域包括氧化还原酶样结构域(Redox domain)、含有AMP结合结构域(A domain)的原核非核糖体肽合成酶样的模块、丙二烯氧化物合成酶样结构域(AOS-like domain)。前期研究发现,DWA1基因可以通过调节干旱诱导的表皮蜡质积累来增强水稻抗旱性,同时也参与了水稻植株干旱胁迫下茉莉酸类物质动态平衡的调控。为了进一步探究DWA1蛋白主要结构域在水稻响应干旱胁迫过程中的功能,我们以保守结构域划分,构建了单个结构域的互补及超表达材料。我们对各个结构域的互补材料进行干旱胁迫,并测定了离体叶片的相对失水速度、相同干旱程度下的叶片相对含水量以及叶片的相对电导率,发现氧化还原酶样结构域、AMP结合结构域、丙二烯氧化物合成酶样结构域的互补材料相比突变体抗旱能力都有所增强,说明这三个结构域均参与DWA1调控的水稻抗旱过程。为探究单个结构域调控植株抗旱性的机制,我们初步检测了单个结构域互补材料的表皮通透性以及蜡质合成相关基因表达量变化。我们发现干旱胁迫下A domain互补材料的表皮通透性低于突变体,而且蜡质合成相关基因表达量检测的结果表明,在突变体中表达A domain可使干旱胁迫过程中蜡质合成相关基因表达模式和野生型基本一致。这些结果说明DWA1可以通过A domain调控表皮蜡质合成参与水稻抗旱。另外,为了解各个结构域是否可以影响水稻植株JA的含量变化,我们检测了干旱前后茉莉酸类物质合成途径中关键基因的表达量,发现在轻度干旱胁迫下野生型、A domain和AOS-like domain互补材料中AOS2的表达量较正常状态都明显升高,但突变体却小幅降低,说明A domain和AOS-like domain能够恢复突变体中AOS2对干旱的快速响应。这些结果表明,A domain和AOS-like domain可能都参与了干旱胁迫下DWA1对水稻植株茉莉酸类物质动态平衡的调控。
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