大黄属八种高山药用植物的化学成分及生物活性研究

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大黄为我国传统的中药材,具有泻下攻积、清热泻火等功效,其主要化学成分包括蒽醌类、鞣质类、苯丁酮类、二苯乙烯类等,这些化合物大部分都具有药理活性。不同大黄属植物化学成分和临床疗效不同,严重影响药材质量和疗效的稳定性。西藏有大黄属植物17种,根据形态、疗效分为君扎、曲扎和曲玛孜三类,但是不同的典籍对君扎、曲扎和曲玛孜大黄的记载不尽相同,在临床用药上也易出现混淆,所以有必要结合化学手段对藏药用大黄的有效成分及生物活性进行测定和分析,为藏药用大黄的合理利用和开发提供理论依据和数据支撑。本论文以掌叶大黄、喜马拉雅大黄、菱叶大黄等八种高山药用大黄的甲醇提取物为研究对象,用高效液相色谱法测定了15个样品中大黄酸、大黄素、芦荟大黄素等16种化合物的含量,并分别用DPPH法、ABTS法和FRAP法做了体外抗氧化研究,还用滤纸片法考察了样品对金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌等13种菌株的抑菌活性。旨在为我区丰富高山药用植物的筛选与开发提供科学依据,同时也为深入研究它们的药理作用奠定基础。主要的研究成果如下:(1)建立了HPLC法同时测定大黄样品中16种化合物含量的方法,并对八种大黄进行了含量测定。结果显示不同品种大黄中16种成分的含量有明显差异。总体来说八种野生大黄药材中喜马拉雅大黄、心叶大黄和掌叶大黄质量最优,其次为穗序大黄和菱叶大黄,头序大黄、西藏大黄和小大黄次之。(2)所测定的样品均有DPPH自由基清除能力,ABTS自由基清除能力及还原Fe3+能力,不同种大黄的抗氧化活性不同,同种大黄不同采样点的抗氧化活性也存在一定差异。结合三种方法的测定结果,心叶大黄、穗序大黄和喜马拉雅大黄具有较好的抗氧化活性,甚至优于掌叶大黄;菱叶大黄、头序大黄、小大黄和西藏大黄的抗氧化活性稍弱。(3)DPPH法IC50的测定结果与大黄素-8-O-葡萄糖苷含量具有显著的负相关性(P<0.05),与芦荟大黄素含量具有显著的负相关性(P<0.05),与大黄素含量具有显著的负相关性(P<0.01)。ABTS法IC50的测定结果与大黄素-8-O-葡萄糖苷含量具有显著的负相关性(P<0.05),与芦荟大黄素含量具有显著的负相关性(P<0.05),与大黄素含量具有显著的负相关性(P<0.01),与大黄酚含量具有显著的负相关性(P<0.05)。FRAP法Trolox当量的测定结果与大黄酚-1-O-葡萄糖苷含量具有显著的正相关性(P<0.05),与大黄素-8-O-葡萄糖苷含量具有显著的正相关性(P<0.01),与大黄素含量具有显著的正相关性(P<0.01),与大黄酚含量具有显著的正相关性(P<0.01)。(4)15个供试样品中只有6个样品具有抑菌活性,这6个样品总共对9种菌株体现出了抑菌活性,供试样品的抑制作用为细菌>真菌,对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强。其中S2(喜马拉雅大黄)的抗菌效果最佳,对金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌等7种菌株都有抑制作用。(5)结合八种大黄中16种化合物含量,抗氧化活性及抑菌活性结果可知这八种大黄中喜马拉雅大黄的质量要优于正品掌叶大黄,可以作为掌叶大黄的替代品,下一步应进一步重视喜马拉雅大黄的应用研究和开发价值。
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