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高山杜鹃(Rhododendron hybrids),杜鹃花科杜鹃花属,常绿灌木类高档观赏植物;主要靠扦插繁殖,而扦插繁殖受母株材料和繁殖季节的影响,往往无法满足市场的需要;用组织培养技术进行观赏植物的繁殖,具有繁殖速度快,不受季节影响等特点,对于优良品种的引进和推广意义重大[1]。本研究以高山杜鹃‘粉冠博士’品种为研究材料,对外植体植入、初代培养、继代增殖、高山杜鹃无菌苗茎段和无菌苗叶片愈伤组织的诱导、分化、壮苗、炼苗移栽以及试管苗褐化、玻璃化预防等进行研究,以期归纳出一整套高山杜鹃‘粉冠博士’组培快繁技术体系。主要研究结果如下:(1)高山杜鹃‘粉冠博士’外植体的取材季节对其存活率有着较大的影响,花苞外植体培养的最佳采取时期为12月份,用酒精处理30s后,再用0.1%的升汞消毒60s时,效果最佳,成活率最高,为74.4%,污染率较低,为11.1%;茎段外植体培养的最佳采取时期为3月下旬到4月上旬,用酒精处理30s后,再用0.1%的升汞消毒9min时,效果最佳,成活率最高,为64.4%,污染率较低,为17.7%。(2)不同的细胞分裂素对花苞的启动率和生长量有一定的影响。不同种类的细胞分裂素对高山杜鹃‘粉冠博士’花苞诱导作用大小依次为:KT>2-ip>6-BA>TDZ。在添加KT的培养基上,花苞的启动率和生长量均达到最大值,分别为74.5%和1.6cm。KT是高山杜鹃‘粉冠博士’花苞启动培养的最适细胞分裂素。(3)启动培养:培养基Anderson+KT12.0mg·L-1+IAA1.0mg·L-1最适宜于高山杜鹃‘粉冠博士’花苞外植体的启动培养,60d时芽诱导率达到75.0%;培养基WPM+2-ip8.0mg·L-1+IAA1.0mg·L-1最适宜于高山杜鹃‘粉冠博士’茎段外植体的启动培养,60d时芽诱导率达到64.4%。(4)丛芽增殖培养:最适宜继代增殖的培养基为Anderson+KT3.0mg·L-1+IAA1.0mg·L-1,增殖系数可达6.11。(5)无菌苗茎段培养和愈伤组织的诱导及分化培养:无菌苗茎段培养和愈伤组织诱导的最适宜培养基为WPM+2-ip8.0mg·L-1+IAA1.0mg·L-1,40d时启动率最高,达到80.00%,平均再生芽数5.33;最适宜茎段愈伤组织分化的培养基为WPM+2-ip3.0mg·L-1+IAA1.0mg·L-1,再生频率达到72.22%,平均出芽数4.11。(6)无菌苗叶片愈伤组织诱导培养:同一叶片的不同部位再生愈伤组织的能力不相同。叶片不同部位愈伤组织的再生能力依次为:叶尖>叶基>叶中;叶片接种方式选择正面向上的接种方式进行诱导;叶片愈伤组织诱导的最适培养基为Anderson+6-BA2.0mg·L-1+2,4-D0.5mg·L-1。(7)叶片的直接分化培养:无菌苗叶片直接分化培养的最适宜培养基为WPM+2-ip8.0mg·L-1+IAA1.0mg·L-1,再生频率最高达70.00%。(8)壮苗培养:在不附加任何生长调节剂的Anderson壮苗培养基上长势最好,叶色浓绿,叶面积增大,茎变粗,有部分处理产生了不定根。(9)生根培养:最适宜高山杜鹃‘粉冠博士’生根的培养基为1/2Anderson+IAA4.0mg·L-1+AC3.0mg·L-1,生根率最高达96.7%。(10)炼苗移栽:最有利于高山杜鹃‘粉冠博士’组培苗移栽存活的基质类型为进口草炭和珍珠岩3∶1的混合物,成活率达86.7%。