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农畜产品中残留的重金属离子已对人类安全构成严重威胁,急需快速、高效的重金属残留检测方法。重金属离子免疫检测是一种新型的检测方法,与传统检测方法相比,具有省时、省力、费用低廉、便于携带、易于操作等优点。重金属离子的免疫检测有多克隆抗体免疫检测和单克隆抗体免疫检测,主要的检测手段包括荧光偏振免疫检测、间接竞争性ELISA、一步法竞争性免疫检测和KinExA仪器检测。本论文的研究目的是合成并鉴定重金属锌螯合物抗原、制备重金属锌螯合物抗原特异性的单克隆抗体,为建立快速检测方法奠定基础。本论文以锌离子通过双功能团金属螯合剂DTPA与KLH的偶联物作为免疫原免疫BALB/c鼠,采用杂交瘤技术建立抗重金属锌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过BALB/c鼠体内收集腹水和体外扩增法大量制备单克隆抗体,经盐析、亲和层析获得纯化的单克隆抗体。本研究获得了以下主要研究结果:1.利用BCA法检测得分离纯化后的Zn-DTPA-OVA、Zn-DTPA-KLH、DTPA-OVA、DTPA-KLH中蛋白实际浓度依次为:25.155±0.038、4.195±0.014、9.242±0.015、6.609±0.025 mg/mL,并发现当A液中含有Zn2+物质的量是B液中含有DTPA物质的量的5倍时是其最佳反应条件,而螯合剂物质的量与蛋白中赖氨酸物质的量的比例为2:1。2.通过石墨炉原子吸收光谱法检测得Zn-DTPA-OVA和Zn-DTPA-KLH中全Zn的含量依次为:295.0±0.3、49.5±0.5μg/mL,而DTPA-OVA、DTPA-KLH和HEPES中全Zn的含量均为0。3.成功建立了三株能稳定分泌抗重金属锌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为C1-1-1,1A1和1A5,杂交瘤上清效价分别为1:160、1:640、1:640。三株抗体均为IgG3,κ型。4.抗原合成成功。制备了抗重金属锌的单克隆抗体,建立了初步的ELISA检测方法。