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猪传染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia，PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae，APP)引起的以肺出血、坏死和纤维素性渗出为主要病变的高度接触性传染病。白1957年Pattison首次报道本病以来，该病在世界范围内广泛流行，并给各国养猪业带来了严重的经济损失。由于APP极易产生耐药性，疫苗接种是防控本病的主要措施。目前，国内主要使用灭活疫苗预防和控制本病。但由于APP血清型较多，灭活疫苗的保护效果十分有限。因此，开发新型疫苗已经成为研究热点。本研究通过基因工程方法，重组表达APP的一种毒力因子，制备了重组亚单位疫苗，并进行了免疫保护效果的探讨。研究表明，APP分泌的外毒素(ApxⅠ、ApxⅢ)和外膜蛋白(Omp)等不仅是APP重要的毒力因子，同时也是重要的免疫原性因子。1成功构建了重组表达载体pET-ApxⅢA。并将3种重组表达载体pET-ApxⅢA、pET-ApxⅠA、pPRo-Omp(后二种为实验室已经构建好)分别在大肠杆菌JM109(DE3)中进行诱导表达，获得3种重组蛋白pET-ApxⅠA(rApxⅠ)、pET-ApxⅢA(rApxⅢ)、pPRo-Omp(rOmp)，大小分别约41、41和45Ku。Western-blotting分析表明，3种重组蛋白具有良好的抗原性。2将rApxⅠ、rApxⅢ和rOmp组合作为疫苗Ⅰ组，rApxⅠ、rApxⅢ、rOmp和灭活菌苗组合作为疫苗Ⅱ组，APP 1、3、7型菌制备的灭活疫苗作为疫苗Ⅲ组，PBSⅣ作为空白对照组，进行家兔的免疫试验。免疫共分3次，每次间隔两周。通过间接血凝试剂盒检测血清特异性抗体、评价重组亚单位疫苗的免疫保护效果。结果表明，疫苗Ⅱ组的抗体水平均显著高于疫苗Ⅲ组，但是疫苗Ⅰ组抗体水平不如疫苗Ⅲ组，其血清效价最高滴度为1：256。