【摘 要】
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目的肝细胞癌是最常见的恶性肿瘤之一,全球每年有数十万新发和死亡病例。尽管目前已根据患者的不同病情采取了综合性治疗,但是其复发转移率依然较高。有氧糖酵解,也被称为Warburg效应,是癌细胞中普遍存在的一种葡萄糖代谢方式。6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶（PFKFB）是其中的关键酶之一,PFKFB3在四种同工酶中具有最高的激酶活性。有许多研究报道PFKFB3参与多种肿瘤的发生发展过程,
【基金项目】
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上海交通大学医学院，附属新华医院科研发展滚动基金项目（GD201912、GD201913）；
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目的肝细胞癌是最常见的恶性肿瘤之一,全球每年有数十万新发和死亡病例。尽管目前已根据患者的不同病情采取了综合性治疗,但是其复发转移率依然较高。有氧糖酵解,也被称为Warburg效应,是癌细胞中普遍存在的一种葡萄糖代谢方式。6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶（PFKFB）是其中的关键酶之一,PFKFB3在四种同工酶中具有最高的激酶活性。有许多研究报道PFKFB3参与多种肿瘤的发生发展过程,但是在肝癌领域还需要更多的研究。方法1.通过RT-qPCR和Western blot检测肝癌细胞系和肝细胞系中PFKFB3的表达量,选择表达量最高的细胞系作为研究对象。2.通过RNAi在肝癌细胞中下调PFKFB3的表达,并通过RT-qPCR和Western blot验证mRNA和蛋白水平的敲低效率。3.选择PFKFB3敲低后的肝癌细胞进行CCK-8、细胞克隆形成和Transwell实验,明确其对肝癌细胞增殖和侵袭转移中的作用;Western blot验证EMT相关蛋白。结果1.PFKFB3在肝癌细胞中异常高表达,并且在HCC-LM3和PLC细胞中表达水平最高。2.在HCC-LM3和PLC中成功构建PFKFB3敲低的细胞模型。3.体外细胞实验明确PFKFB3高表达促进肝癌细胞的增殖和迁移,并且PFKFB3能够影响EMT相关标记物的表达。结论PFKFB3通过调控EMT在肝癌的生长和转移中发挥作用,提示干预PFKFB3可能成为治疗肝癌的一种手段。
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