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目的:制备一种集诊断与治疗一体化的多功能超声造影剂。通过甘草次酸(GA)的修饰和抗癌药物的包裹可以达到对肝癌的靶向治疗。以低沸点液态氟碳为核心;磷脂材料为外壳;制备纳米级超声液滴;使其可通过肿瘤EPR效应进入肿瘤组织间隙;再由外力作用(加热或超声辐照)发生液-气相变而进行超声显影。通过考察该系统的体内外性质;靶向抗癌效果以及显影特征;评价该制剂的安全性;有效性及实用性;为进一步的研究和应用奠定基础。 方法:首先建立和厚朴酚(HK)的体外含量测定方法;合成 GA修饰的磷脂材料并制备超声纳米液滴;考察液滴的包封率和载药量;测量其粒径和电位;以透射电子显微镜(TEM)观察其形貌特征。采用傅里叶变化红外光谱(FT-IR)验证GA是否修饰成功;再考察体外相变显影特征以及体外释药行为。在细胞水平上;采用MTT法考察各组制剂对 HepG2 细胞的毒性;采用激光共聚焦显微镜(CLSM)观察细胞对有无 GA 修饰的两组制剂的摄取情况。在动物试验中;建立荷HepG2 肿瘤的动物模型;并考察各制剂的抗癌活性和系统毒性;评价该系统的靶向治疗效果和安全性。 结果:采用 UV 法测定 HK 的含量;此法专属性强;简单易行。甘草次酸修饰的载和厚朴酚超声纳米液滴(GA-HK-NDs)的包封率和载药量分别为83.15 ±2.58% 和 7.92 ±0.26%。空白纳米液滴(NDs);载和厚朴酚纳米液滴(HK-NDs)和GA-HK-NDs的粒径分别为308 ± 168.2 nm;314.8 ±208.2 nm和324.8 ±183.7 nm; zeta-电位分别为-44.8 ±4.44 mV;-43.9 ±4.69 mV和-29.9 ±6.13 mV;TEM观察液滴的形貌特征为圆整的实心球。FT-IR结果证明GA修饰的磷脂材料制备成功。体外相变显影实验考察了热致相变和声致相变;其结果显示;随着温度的增加;相变逐渐加强;显影效果增强;同样;随着超声辐照的功率增加;或者超声作用时间的延长;超声显影的效果也在增强。体外释放行为表明;纳米液滴包裹和厚朴酚之后;具有药物缓释的作用。细胞毒性试验显示;GA修饰后的纳米液滴对HepG2细胞具有更强的抑制作用;摄取实验也证明了 GA 修饰的纳米液滴具有肝靶向作用; GA-HK-NDs 能被更快的摄取。动物实验结果显示; GA-HK-NDs 比HK-NDs抑制肿瘤生长的效果更强;具有更高的抑瘤率;两组制剂抑瘤率分别为 71.92 %和 34.76%。在本实验的给药条件下;HK-NDs 和GA-HK-NDs对小鼠基本无系统毒性。在HK-NDs处理组;肿瘤组织中可看到部分凋亡坏死区域;而在 GA-HK-NDs 处理组;肿瘤组织出现大片的凋亡坏死区域;说明了GA-HK-NDs 对HepG2 细胞移植瘤具有更强的抗癌效果。 结论:本实验成功制备了一种集诊断与治疗一体化的多功能超声造影剂。以和厚朴酚为模型药物;验证了 GA 的修饰以及对肝癌细胞的特异性靶向传递功能。本实验考察了该系统的药剂学性质;在细胞水平上研究了对HepG2细胞的抑瘤作用和靶向作用;并在动物实验中评价其抗癌活性和安全性;完成了本课题设计的实验目的;为诊疗一体化平台提供一种新策略;具有良好的临床应用前景。