龙血竭对X射线辐射损伤小鼠防护作用的研究

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目的:放射治疗是恶性肿瘤的主要治疗手段之一,放射线在杀死肿瘤细胞的同时,对机体的正常细胞、组织、器官也造成了不同程度的损伤,这不仅影响肿瘤放疗的效果,也给病人带来极大的痛苦。如何选择低毒,安全有效的辐射防护药物来减轻放射治疗引起的毒副反应,提高肿瘤的治疗效果,成为了辐射防护药物研究的热点。中药药源广、毒性小、副作用少,一些具有清热解毒、活血化瘀、补血益气、养阴升白作用的中药,均有不同程度的抗辐射作用。龙血竭为剑叶龙血树含脂木材的醇提物,研究表明,龙血竭具有活血化瘀、抗凝血、敛疮生肌、镇痛、抗炎抗肿瘤、降血糖、抗氧化损伤的功效;其酚类化合物:白藜芦醇、紫檀芪、龙血素A和龙血素B为龙血竭的活性成分,能够直接清除自由基。龙血竭的药理作用广泛,但目前有关龙血竭抗辐射作用的研究报道甚少,因此,本文对其抗辐射作用进行了研究,为进一步开拓其临床应用提供了实验依据。方法:将雄性清洁级ICR小鼠,随机分为阴性对照组、阳性对照组和龙血竭保护组。阴性对照组和阳性对照组给予羧甲基纤维素钠(CMC-Na),保护组给予不同浓度的龙血竭(100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg),灌胃给药,每天一次,连续14天,第15天除了阴性对照组以外均给予全身一次性X射线照射,源靶距70cm,剂量率0.511Gy/min,照射剂量分别为1.0Gy、2.0Gy、3.0Gy和4.0Gy。照射后72h处死动物,分别检测外周血白细胞,骨髓有核细胞,脾脏指数、胸腺指数,计数脾结节数、骨髓嗜多染红细胞微核率;测定小鼠肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性和丙二醛(MDA)的含量。采用EXCEL进行数据录入,使用SPSS19.0软件进行统计分析。多组资料间的比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验,以p<0.05为差异有统计学意义。结果:1.400mg/kg的龙血竭对小鼠肝脏MDA含量和骨髓嗜多染红细胞微核的影响单纯给予小鼠400mg/kg龙血竭以后,与阴性对照组相比小鼠肝脏mda含量和骨髓嗜多染红细胞微核率有降低趋势,但差异无统计学意义(p>0.05)。2.龙血竭对x射线辐射损伤小鼠外周血白细胞的影响小鼠接受2.0gyx射线照射前,预防性给予低、中、高浓度的龙血竭,其外周血白细胞与对照组相比明显增多,且随着龙血竭给药浓度的增加而增加,其中200mg/kg和400mg/kg的龙血竭保护组小鼠的白细胞数与对照组相比差异均有统计学意义(p<0.05),100mg/kg龙血竭给药组小鼠外周血白细胞虽有升高趋势,但差异无统计学意义(p>0.05)。小鼠接受不同剂量x射线照射以后,外周血白细胞降低,且随着照射剂量的增加白细胞下降越明显,与阴性对照组相比差异均有统计学意义(p<0.01),预防性给予400mg/kg的龙血竭可升高外周血白细胞,与阳性对照组比较差异均有统计学意义(p<0.05或p<0.01)。3.龙血竭对x射线辐射损伤小鼠脾脏指数、胸腺指数和脾结节的影响小鼠接受2.0gyx射线照射前,预防性给予低、中、高浓度的龙血竭,能够明显减轻x射线对小鼠脾脏指数和胸腺指数的降低程度,且随着龙血竭给药浓度的增加脾脏指数和胸腺指数升高的程度越明显;200mg/kg和400mg/kg龙血竭保护组小鼠的脾脏指数和胸腺指数明显高于对照组,差异均有统计学意义(p<0.01或p<0.05);100mg/kg龙血竭给药组小鼠的脾脏指数和胸腺指数与阳性对照组相比有升高的趋势,但差异无统计学意义(p>0.05);在接受2.0gyx射线照射前,预防性给予低、中、高浓度的龙血竭,脾结节与对照组相比有增多的趋势,但差异无统计学意义(p>0.05)。小鼠接受不同剂量x射线照射,其脾脏指数和胸腺指数与阴性对照组相比明显降低,差异有统计学意义(p<0.01),且随着照射剂量的增加脾脏指数和胸腺指数下降越明显;预防性给予400mg/kg龙血竭后,龙血竭保护组小鼠脾脏指数和胸腺指数与阳性对照组相比明显升高,差异有统计学意义(p<0.05或p<0.01)。4.龙血竭对x射线辐射损伤小鼠骨髓有核细胞的影响小鼠接受2.0gyx射线照射前预防性给予不同浓度的龙血竭,能够增加骨髓有核细胞,100mg/kg和200mg/kg龙血竭保护组小鼠的骨髓有核细胞与对照组相比虽有升高的趋势,但差异均无统计学意义(p>0.05);400mg/kg龙血竭保护组小鼠的骨髓有核细胞与对照组相比差异有统计学意义(p<0.05)。小鼠接受不同剂量x射线照射后,骨髓有核细胞降低,且随着照射剂量的增加降低越明显,与阴性对照组相比差异均有统计学意义(p<0.01)。预防性给予400mg/kg龙血竭,可以降低照射后辐射损伤小鼠骨髓有核细胞的下降程度,与阳性对照组相比差异均有统计学意义(p<0.05)。5.龙血竭对x射线辐射损伤小鼠肝脏sod、cat、gsh-px活性和mda含量的影小鼠接受2.0gyx射线照射前预防性给予不同浓度的龙血竭,与对照组相比,低浓度的龙血竭有升高sod、cat和gsh-px活性的趋势,低和中浓度的龙血竭有降低肝脏mda含量的趋势,但差异均无统计学意义(p>0.05);200mg/kg和400mg/kg的龙血竭能够明显提高肝脏sod、cat和gsh-px的活性,与对照组相比差异均有统计学意义(p<0.05或p<0.01),400mg/kg的龙血竭能够明显降低肝脏mda的含量,与对照组相比差异有统计学意义(p<0.01)。小鼠接受不同剂量x射线照射以后,肝脏sod、cat和gsh-px的活性降低,且随着照射剂量的增加下降的程度越明显,与阴性对照组相比差异均有统计学意义(p<0.01),给予400mg/kg龙血竭能够提高受照射小鼠肝脏sod、cat和gsh-px的活性,降低肝脏mda的含量,与阳性对照组相比差异均有统计学意义(p<0.05或p<0.01)。6.龙血竭对x射线辐射损伤小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的影响小鼠接受2.0gyx射线照射前,预防性给予低、中、高浓度的龙血竭,能够明显降低骨髓嗜多染红细胞微核率,但低浓度与中浓度龙血竭保护组与对照组相比虽能降低骨髓嗜多染红细胞微核率,但差异均无统计学意义(p>0.05);高浓度龙血竭能明显降低骨髓嗜多染红细胞微核率,与阳性对照组相比差异有统计学意义(p<0.01)。小鼠接受不同剂量x射线照射后,骨髓嗜多染红细胞微核率与阴性对照组相比明显升高(p<0.01),且随着照射剂量的增加微核率升高越明显;预防性给予400mg/kg龙血竭,可以明显降低受照射小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率,与阳性对照组相比均有统计学差异(p<0.01)。结论:1.龙血竭能够提高受照小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞计数、脾脏和胸腺指数;2.龙血竭能够提高受照小鼠肝脏sod、cat和gsh-px的活性,降低mda的含量;3.龙血竭能够降低受照小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率。综上所述,龙血竭对受照小鼠有一定的辐射防护作用,推测其可能与提高机体抗氧化酶的活性,增加机体清除自由基的能力有关。但是对于龙血竭具体的抗辐射作用机制尚需进一步研究。
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