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目的
研究MicroRNA-29c（miR-29c）、细胞分裂周期蛋白42（celldivisioncycle42，CDC42）在喉鳞状细胞癌（laryngealsquamouscellcarcinoma,LSCC）中的表达，及miR-29c通过靶向CDC42对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖与侵袭的影响，分析miR-29c对Hep-2细胞增殖、细胞周期变化、迁移、侵袭等生物学行为的影响，并通过检测细胞分裂周期蛋白42（celldivisioncycle42，CDC42）的表达来探讨miR-29c可能的分子机制。
方法
收集66例诊断为LSCC患者的肿瘤组织和癌旁正常组织。利用实时荧光定量PCR（QuantitativeReal-timePCR，qRT-PCR）检测miR-29c的表达；构建miR-29c过表达载体，转染Hep-2细胞，设立对照组，CellCountingKit-8试剂盒（CCK8））检测细胞增殖能力；Transwell迁移实验检测细胞侵袭；Western-blot检测过表达miR-29c对Hep-2细胞CDC42蛋白的影响；免疫组化检测临床样本中CDC42的表达；双荧光素酶报告系统验证CDC42基因是否为miR-29c的靶基因。
结果
①喉鳞状细胞癌组织中miR-29c相对表达量明显低于癌旁正常组织（P＜0．01）；②Hep-2细胞过表达miR-29c后，细胞增殖能力明显低于对照组（P＜0．05）；③Hep-2细胞侵袭能力减弱（P＜0.05）；④miR-29c能够下调CDC42蛋白的表达量（P＜0.05）；⑤LSCC患者的CDC42蛋白表达明显高于正常组织；⑥miR-29c在喉癌中的相对表达量与CDC42蛋白的表达量呈负相关（P＜0.05）；⑦双荧光素酶报告系统显示miR-29c能够抑制靶基因CDC42载体荧光素酶活性（P＜0.01）。结论
①在LSCC，miR-29c呈低表达；②miR-29c抑制喉癌的增殖与侵袭；③在LSCC，CDC42呈高表达；④miR-29c能够下调CDC42蛋白的表达，CDC42作为miR-29c的下游靶基因，受其调控；⑤miR-29c可通过靶向CDC42蛋白抑制Hep-2细胞的增殖与侵袭；⑥miR-29c作为抑癌基因在喉癌发生发展中起重要作用；⑦提供了用于喉鳞状细胞癌免疫治疗的潜在、新的靶点。
研究MicroRNA-29c（miR-29c）、细胞分裂周期蛋白42（celldivisioncycle42，CDC42）在喉鳞状细胞癌（laryngealsquamouscellcarcinoma,LSCC）中的表达，及miR-29c通过靶向CDC42对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖与侵袭的影响，分析miR-29c对Hep-2细胞增殖、细胞周期变化、迁移、侵袭等生物学行为的影响，并通过检测细胞分裂周期蛋白42（celldivisioncycle42，CDC42）的表达来探讨miR-29c可能的分子机制。
方法
收集66例诊断为LSCC患者的肿瘤组织和癌旁正常组织。利用实时荧光定量PCR（QuantitativeReal-timePCR，qRT-PCR）检测miR-29c的表达；构建miR-29c过表达载体，转染Hep-2细胞，设立对照组，CellCountingKit-8试剂盒（CCK8））检测细胞增殖能力；Transwell迁移实验检测细胞侵袭；Western-blot检测过表达miR-29c对Hep-2细胞CDC42蛋白的影响；免疫组化检测临床样本中CDC42的表达；双荧光素酶报告系统验证CDC42基因是否为miR-29c的靶基因。
结果
①喉鳞状细胞癌组织中miR-29c相对表达量明显低于癌旁正常组织（P＜0．01）；②Hep-2细胞过表达miR-29c后，细胞增殖能力明显低于对照组（P＜0．05）；③Hep-2细胞侵袭能力减弱（P＜0.05）；④miR-29c能够下调CDC42蛋白的表达量（P＜0.05）；⑤LSCC患者的CDC42蛋白表达明显高于正常组织；⑥miR-29c在喉癌中的相对表达量与CDC42蛋白的表达量呈负相关（P＜0.05）；⑦双荧光素酶报告系统显示miR-29c能够抑制靶基因CDC42载体荧光素酶活性（P＜0.01）。结论
①在LSCC，miR-29c呈低表达；②miR-29c抑制喉癌的增殖与侵袭；③在LSCC，CDC42呈高表达；④miR-29c能够下调CDC42蛋白的表达，CDC42作为miR-29c的下游靶基因，受其调控；⑤miR-29c可通过靶向CDC42蛋白抑制Hep-2细胞的增殖与侵袭；⑥miR-29c作为抑癌基因在喉癌发生发展中起重要作用；⑦提供了用于喉鳞状细胞癌免疫治疗的潜在、新的靶点。