论文部分内容阅读
目的1.以多巴胺及硝酸甘油诱导的时相性偏头痛大鼠为动物模型,科学探讨调和营卫法对时相性偏头痛大鼠的脑血流和血管内皮功能调节机制,并分析桂枝-白芍最佳应用剂量。2.通过对偏头痛患者头痛发作情况、中医证候及PRO量表评分等指标探索分析,对调和营卫法临床应用可行性进行探讨,为中医防治偏头痛提供思路,为指导临床应用提供证据。方法1.时相性偏头痛大鼠模型的复制将30只SD雄性大鼠随机分成空白组、溶媒组以及模型组3组,每组10只;空白组不予药物干预;模型组按体重先皮下注射盐酸多巴胺20mg/kg,45min后腹部皮下注射硝酸甘油1Omg/kg进行造模。溶媒组相同时点皮下注射生理盐水0.2ml/100g。通过激光散斑血流灌注视频系统(PeriCam PSI),对大鼠脑组织灌注血流量进行动态观察。分别记录给药前,第一次给药后9、18、27、36、45min脑灌注血流量及第二次给药后1、10、19、28、37、46、55、64、73min灌注血流量,共15个时点,计2小时;2.桂枝-白芍防治偏头痛的最佳剂量与配伍比例2.1分组、造模与脑灌注血流量观察将100只SD雄性大鼠随机分成空白组、桂0芍0组(溶媒组)、桂0芍1组、桂0芍2组、桂1芍0组、桂1芍1组、桂1芍2组、桂2芍0组、桂2芍1组、桂2芍2组10组;每组各10只(桂0=桂枝0g,桂1=桂枝10g,桂2=桂枝20g;芍0=白芍0g,芍1=白芍10g芍2=白芍20g),空白组不建立偏头痛模型,其余各组建立偏头痛模型。各偏头痛模型组连续灌胃相应药物7天,空白组不灌胃给药。7天后对SD大鼠脑灌注血流量观察,监测方法同时相性特点偏头痛大鼠模型复制阶段。2.2动脉血神经肽含量监测:造模后2小时取腹主动脉血,通过放射免疫分析法测定血浆ET含量,分光光度法测定血浆NO含量。3.调和营卫法治疗偏头痛临床疗效初探通过门诊将符合纳入标准的患者招募入组。入组后通过调和营卫法进行治疗,疗程为4周,停药4周随访1次。主要疗效观察指标为头痛发作次数、头痛发作天数、头痛发作程度;次要疗效性观测指标为头痛发作次数减半率、头痛发作天数减半率、头风病中医证候变化情况、偏头痛基于患者报告的结局评价(PRO量表)等。结果1.时相性偏头痛大鼠模型的复制模型组大鼠脑灌注血流量变化率在注射盐酸多巴胺后5个时点与空白组及溶媒组比较具有统计学差异,偏头痛模型大鼠注射盐酸多巴胺后脑组织灌注血流量减少明显;模型组脑灌注血流量变化率在注射硝酸甘油后1、10、19、28min与空白组及溶媒组比较具有统计学差异,37、46、55、64、73min时点与空白组比较具有统计学差异,偏头痛模型大鼠注射硝酸甘油后大鼠脑组织灌注量升高明显。2.桂枝-白芍防治偏头痛的最佳剂量与配伍比例2.1各偏头痛大鼠模型组组间比较2.1.1各偏头痛大鼠模型组脑灌注血流量比较偏头痛血管收缩相,各偏头痛模型大鼠组脑灌注血流量变化率在收缩相9、18、27、45min比较具有统计学差异。桂枝作用在9、18min各剂量组间比较具有统计学差异;白芍在9、27、36、45min各剂量组间比较具有统计学差异,桂枝-白芍交互作用各时点具有统计学差异。在收缩相桂枝20g白芍20g及桂枝10g白芍10g时脑灌注血流量下降最少。偏头痛血管舒张期,各偏头痛模型大鼠组脑灌注血流量变化率在舒张相各时点具有统计学差异;桂枝各剂量在舒张相1、10、19、28、55、64min 比较具有统计学差异。白芍各剂量、桂枝-白芍交互作用在舒张相比较具有统计学差异。桂枝20g-白芍20g组与桂枝10g-白芍10g组大鼠脑灌注血流量较基线下降趋势最明显。2.1.2各偏头痛大鼠模型组神经肽比较各偏头痛模型大鼠组ET-1含量组间比较有统计学差异。白芍各剂量、桂枝-白芍交互作用组间比较统计学差异,白芍0g、20g剂量时ET-1含量较低。桂枝0g白芍0g时ET-1含量最高,桂枝0g白芍10g时ET-1含量最低。各偏头痛模型组NO含量进行组间比较,桂枝-白芍剂量各组无统计学差异。2.2空白组和各偏头痛模型组对比2.2.1空白组和各偏头痛模型组脑灌注血流量区别空白组与各偏头痛大鼠模型组脑灌注血流量变化率在收缩相各时点比较具有统计学差异。两两比较后桂枝20g白芍20g组与空白组在27、36min比较无统计学差异;空白组与桂枝10g组18、27、45min 比较无统计学差异;在舒张相各时点比较具有统计学差异。两两比较后桂枝20g白芍20g组与空白组在舒张相各时点比较无统计学差异;桂枝10g白芍10g组与空白组除64min外各时点比较无统计学差异。2.2.2空白组和各偏头痛模型组神经肽区别空白组NO含量与各偏头痛模型组进行组间比较,无明显统计学差异。空白组ET-1含量与各偏头痛模型组含量比较具有统计学差异。两两比较,空白组与桂枝20g白芍20组、桂枝20g白芍10组、桂枝20g组等比较无统计学差异。3.调和营卫法治疗偏头痛临床疗效初探治疗4周后,头痛发作次数、头痛发作程度与治疗前比较有显著统计学差异;头风中医证候各证积分及总积分改善,郁证证候积分与治疗前比较有显著统计学差异;偏头痛PRO量表与治疗前进行比较,头痛情况、躯体症状及PRO总分较治疗前有统计学差异。结论1.通过多巴胺及硝酸甘油诱导,可以成功复制具有血管收缩相及血管扩张相的时相性偏头痛大鼠模型。2.时相性偏头痛模型大鼠偏头痛发作期,调和营卫法对于偏头痛大鼠脑灌注血流量及动脉神经肽含量具有调节作用。桂枝20g-白芍20组可以更好维持偏头痛大鼠脑灌注血流量稳定及通过调节神经肽降低外周血ET-1,有效改善偏头痛大鼠血管舒缩情况。即桂枝20g-白芍20g且1:1配比下是防治偏头痛最佳剂量与配比组合。3.调和营卫法可以改善偏头痛患者偏头痛基本病情、中医证候,对于头痛发作情况及躯体症状有治疗意义,在偏头痛防治方面具有可行性。