白藜芦醇改善大鼠甲醛源性甲状腺相关激素水平下降及继发性学习记忆功能减退的机制研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong581
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[目 的]探究白藜芦醇在液态甲醛源性大鼠甲状腺相关激素水平下降及继发性学习记忆功能减退中的作用及相关机制。[方 法]60 只无特定病原菌(Specified Pathogen Free,SPF)的雄性 SD(Sprague Dawley,SD)大鼠按随机数表法分为5组,(1)正常对照组(C组):腹腔注射(i.p)等体积0.9%NaCl溶液+0.5%羧甲基纤维素(CMC)溶液灌胃(i.g);(2)甲醛蓄积组(FA):20 mg/kg FA(i.p)+0.5%CMC(i.g);(3)白藜芦醇组(RES):0.9%NaCl(i.p)+50 mg/kg RES(i.g);(4)甲醛蓄积+低浓度白藜芦醇组(FAL):20 mg/kg FA(i.p)+50 mg/kg RES(i.g);(5)甲醛蓄积+高浓度白藜芦醇组(FAH):20 mg/kg FA(i.p)+100 mg/kg RES(i.g),共 15d。实验结束后称重,水迷宫实验(Morris Water Maze,MWM)检测空间学习记忆功能,检测三碘甲腺原氨酸(Triiodothyronine,T3)、四碘甲腺原氨酸(Tetraiodothyronine,T4)和促甲状腺素(Thyroid-Stimulating Hormone,TSH)水平;HE染色、尼氏染色观察海马CA1、CA3区组织形态学变化及神经元状况;蛋白免疫印迹技术(Western Blot,WB)和实时荧光定量PCR(Real Time Quantitative PCR,RT-qPCR)检测大鼠脑内神经颗粒素(Neurogranin,Ng)、Ca2+-CAM 依赖性蛋白激酶 Ⅱ(Ca2+-Calmodulin dependent protein kinase,CAMKⅡ)、蛋白激酶C(Protein Kinase C,PKC)的蛋白表达及mRNA水平。[结 果](1)大鼠体重结果显示:与C组相比,RES组大鼠体重无显著差异(P>0.05),FA组体重显著下降(P<0.01),白藜芦醇干预后FAL组和FAH组大鼠的体重均明显升高(均P<0.05),呈剂量依赖性。(2)甲状腺质量结果显示:与C组相比,RES组大鼠的甲状腺质量无显著差异(P>0.05),FA组大鼠的甲状腺质量显著下降(P<0.01),白藜芦醇干预后FAL组及FAH组大鼠的甲状腺质量均有所升高(均P<0.05),呈剂量依赖性。(3)血清HPT轴相关激素水平结果显示:与C组相比,FA组大鼠的T3、T4、TSH水平均显著下降(均P<0.01),白藜芦醇干预后FAL组和FAH组大鼠的T3、T4、TSH均水平显著升高(均P<0.05),呈剂量依赖性。C组及RES组大鼠的血清HPT轴相关激素水平均无显著差异(均P>0.05)。(4)水迷宫实验结果显示:各组大鼠的逃避潜伏期均呈下降趋势。与C组相比,FA组大鼠的逃避潜伏期及目标象限时间占比显著延长(均P<0.01),穿越目标平台的次数显著降低(均P<0.01),白藜芦醇干预后FAL组及FAH组大鼠的逃避潜伏期及目标象限时间占比均显著下降(均P<0.05),穿越目标平台的次数均显著升高(均P<0.05),呈剂量依赖性。C组及RES组大鼠的水迷宫实验相关指标无显著差异(均P>0.05)。(5)HE和Nissl染色结果显示:与C组相比,FA组大鼠海马CA1区和CA3区的细胞排列紊乱,细胞核固缩,细胞膜破裂,对Nissl染色海马CA1区和CA3区的神经元进行计数后发现其神经元数目均显著下降(均P<0.01)。白藜芦醇干预后FAL组和FAH组大鼠海马CA1区和CA3区的细胞排列较整齐紧密,对Nissl染色海马CA1区和CA3区的神经元进行计数后发现其神经元数目均显著提高(均P<0.05),呈剂量依赖性。C组及RES组大鼠的HE和Nissl染色结果均无显著差异(均P>0.05)。(6)WB和RT-qPCR结果显示:与C组相比,FA组大鼠海马区和下丘脑的Ng、CAMKⅡ、PKC蛋白表达和mRNA水平均显著下降(P<0.01),白藜芦醇干预后大鼠海马区和下丘脑的Ng、CAMKⅡ、PKC蛋白表达和mRNA水平均显著升高(均P<0.05),呈剂量依赖性。C组及RES组大鼠海马区和下丘脑区的WB和RT-qPCR结果均无显著差异(均P>0.05)。[结论]白藜芦醇可改善暴露于液态甲醛后大鼠的甲状腺激素水平下降、海马区组织结构损害及功能障碍,提高大鼠空间学习记忆功能,其机制可能与Ng-CAMKⅡ-PKC信号通路相关。
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