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目的:使用博莱霉素诱导C57BL/6小鼠肺纤维化,建立肺纤维化动物模型,观察TGF-β/Smad信号通路在小鼠肺纤维化中的作用以及对纤维连接蛋白(FN)、骨桥蛋白(OPN)表达的影响,进一步探讨肺纤维化可能的发病机制。方法:将健康雄性C57BL/6小鼠(20g±2g)72只,按随机数字表法随机分为三组:对照(NS)组、模型(M)组、SB431542阻断(SB)组,每组24只。造模第一日,M组和SB组采用气管内滴注博莱霉素(BLM)稀释液(按3.5mg/kg剂量稀释,溶剂为0.9%氯化钠注射液,总稀释量为50μl)方法进行小鼠肺纤维化模型的建立,NS组气管内滴入50ul的0.9%氯化钠注射液;SB组小鼠分别于造模后第3、4、5天腹腔内注射浓度为0.5g/L的SB431542(按4.2mg/Kg,溶于为10%乙醇中),共三次,其余2组于同时间点给予相等量的10%乙醇溶液。于造模后第7、14、28天随机抽取各组中8只小鼠(共24只),经腹主动脉放血法致死,取肺组织标本。肺组织病理切片行HE、Masson染色,观察评估小鼠肺泡炎反应和纤维化改变情况;样本碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸含量,进一步评估肺纤维化的程度;免疫组化法测定肺组织中FN、OPN、p-Smad3蛋白的表达,各组进行对比。结果:1.NS组小鼠肺组织结构基本正常,M组小鼠于第7天时肺泡炎症明显,第14天时开始纤维化改变,于第28天时肺炎症减轻及纤维化改变显著;SB组各时间点的小鼠肺泡炎及纤维化程度均较M组明显减轻。2.NS组三个时间点HYP含量无明显变化,其余两组各时间点HYP含量随着时间推移均升高,于第28天时达到高峰;M组和SB组第14、28天时HYP含量较NS组均升高(P<0.05),但SB组各时间点HYP含量较同期M组有所下降(P<0.05)。3.p-Smad3主要在小鼠肺组织的巨噬细胞、成纤维细胞、肺泡及支气管上皮细胞等胞浆中表达。FN主要于小鼠肺血管、支气管周围、肺泡间隔及增生的间质细胞胞质内表达。NS组肺组织中有少量的p-Smad3、FN的阳性表达,M组在各时间点的p-Smad3、FN的表达均较NS组有所增加,差异具有统计学意义(P<0.05),而p-Smad3于第28天时达到高峰,FN于第14天时达到高峰。OPN主要分布于气管壁及血管壁平滑肌,肺间质巨噬细胞和肺泡上皮细胞内。与NS组相比,M组在各时间点的OPN的表达均有所增加(P<0.05),于第28天时增加最明显。与M组比较,SB组各时间点的p-Smad3、FN、OPN的表达均明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:FN参与了肺纤维化小鼠早期的肺泡炎性损伤的发生与发展,OPN参与了肺纤维化的全过程,两者在肺纤维化形成过程中起着重要作用。其中TGF-β/Smad是小鼠肺纤维化发生的重要信号通路,通过阻断此信号通路可能抑制FN、OPN的表达,进而可能抑制肺纤维化发生与发展。