细菌群体感应信号分子合成酶AmbB的结构生物学研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dududi
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
随着临床上抗生素的广泛使用,细菌已出现耐药性,因此寻找新的抗感染途径已成为当今研究的热点。群体感应(quorum sensing, QS)作为细菌间传递信号的重要方式,可释放自诱导物分子来调控多种毒力因子的释放以及细菌的致病性。如今,QS已经成为新型、抗耐药菌药物设计的重要靶标,因该药物不影响细菌生长只抑制QS调控的致病行为,理论上不会引起细菌的耐药性。铜绿假单胞菌是一种可引起呼吸道感染、肺炎等疾病的条件致病菌,其存在三种基于信号分子的QS系统:las、rhl和pqs系统。其中,las系统处于核心地位,它可以调控rhl和pqs的基因表达。但是,随着对铜绿假单胞菌QS系统的深入研究发现,las在群体感应调节中的核心地位并不是绝对的。研究显示非核糖体肽合成酶AmbB参与合成一种新型QS信号分子IQS,它在环境压力下(如低磷环境)取代las进而对rhl、pqs系统进行调控。本论文拟通过生物化学的方法,结合X射线晶体学的研究手段对AmbB蛋白的C端结构域进行研究,以期从结构生物学角度阐释群体感应信号分子IQS的产生机制,亦或为今后群体感应抑制剂的研发提供理论基础。本研究结果包括:1.成功构建表达载体,并利用原核系统表达蛋白,已获得大量高纯度AmbBc蛋白;2.筛选到10种AmbBc晶体生长条件,经优化成功得到用于衍射的单晶;3.收集到分辨率高达2.5A的数据;4.成功制备重金属衍生物及硒代甲硫氨酸晶体;5.通过定点突变引入甲硫氨酸增强反常散射信号解决相位问题,目前蛋白结构已成功解析。
其他文献
脑高级功能的实现依赖于神经元组成的复杂网络。在体研究表明神经网络具有非随机复杂网络的特征,而其形成机制尚不明确,可能由遗传因素决定,也可能是后天环境刺激输入的结果。神
石刁柏(AsparagusofficinalisL.)又名芦笋、龙须菜,属于百合科天门冬属多年生宿根性草本植物。石刁柏是典型的雌雄异株植物,不仅可以作为研究雌雄异株植物性别决定与分化的模式植
洋葱是百合科葱属植物,历史悠久,可药食两用。洋葱的主要功效成分是由蒜氨酸酶催化裂解蒜氨酸产生一系列含硫化合物,尤其是硫代亚磺酸酯(Thiosulfinates,TS),它们主要存在于经酶解、萃取制得的洋葱精油中。因此,对洋葱精油最大限度的富集是确保洋葱功效作用的最有效的方法。洋葱中含硫化合物的富集既与蒜氨酸酶有关,也与提取方法有密切关系。为了避免洋葱中的催泪因子合成酶(Lachrymatory F