【摘 要】
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目的:本研究通过观察0-4周龄正常小鼠生长板各带的厚度,了解0-4周龄小鼠生长板厚度的变化规律;通过观察CUL7、CCDC8、LC3蛋白在0-4周龄小鼠生长板的表达位置变化和表达量的变化,来说明CUL7、CCDC8蛋白和自噬在正常小鼠胫骨生长板增殖、分化过程中的作用。方法:1.通过HE染色观察0-4周龄正常小鼠胫骨生长板静止带、增殖带、肥大带厚度和总体厚度的变化规律。2.通过免疫组织化学染色观察C
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目的:本研究通过观察0-4周龄正常小鼠生长板各带的厚度,了解0-4周龄小鼠生长板厚度的变化规律;通过观察CUL7、CCDC8、LC3蛋白在0-4周龄小鼠生长板的表达位置变化和表达量的变化,来说明CUL7、CCDC8蛋白和自噬在正常小鼠胫骨生长板增殖、分化过程中的作用。方法:1.通过HE染色观察0-4周龄正常小鼠胫骨生长板静止带、增殖带、肥大带厚度和总体厚度的变化规律。2.通过免疫组织化学染色观察CUL7、CCDC8和LC3蛋白在0-4周龄正常小鼠胫骨生长板中的表达位置及表达量的变化规律。3.通过Western Blot检测0-4周龄正常小鼠胫骨生长板中CCDC8和LC3蛋白总表达量的变化规律。结果:1.0-4周龄小鼠胫骨生长板各带厚度和总厚度,都随着周龄的增加,逐渐变薄（差异具有统计学意义,F=477.291,P<0.001）。静止带厚度下降最为显著,其次是增殖带、肥大带。2.CUL7蛋白在0-4周正常小鼠的胫骨生长板静止带、增殖带和肥大带胞浆和胞膜中均有表达。CUL7蛋白在生长板软骨各带中的表达量和总表达量,随着周龄的增加而逐渐减少（差异具有统计学意义,F=369.61,P<0.001）。CUL7蛋白的表达量在增殖带下降最为显著,其次是静止带、肥大带。3.CCDC8蛋白0-2周主要在生长板的增殖带和肥大带胞膜和胞核表达,3-4周主要在肥大带胞膜和胞核表达。增殖带中的CCDC8蛋白表达量随着周龄的增加而下降,肥大带中的CCDC8蛋白表达量随着周龄的增加而增加（差异具有统计学意义,F=453.67,P<0.001）。生长板中总的CCDC8蛋白表达量随着周龄的增加而下降。4.LC3蛋白早期主要在静止带和增殖带胞核表达,后期主要在增殖带和肥大带胞浆和胞核表达。随着周龄增加,静止带和增殖带中的LC3蛋白表达量逐渐减少,肥大带中的LC3蛋白表达量先是增加,之后逐渐减少。0-4周正常小鼠胫骨生长板中总的LC3蛋白表达量随着周龄的增加而下降（差异具有统计学意义,F=617.43,P<0.001）。结论:1.胫骨生长板各带厚度和总厚度都随着周龄的增加而下降,尤其静止带和增殖带厚度下降最为显著,说明静止带和增殖带软骨细胞在促进长骨的线性生长方面有着重要的作用。2.CUL7蛋白在生长板静止带、增殖带和肥大带软骨细胞的胞浆和胞膜中表达;CCDC8蛋白在生长板增殖带和肥大带的胞膜和胞核中表达;LC3蛋白早期在静止带和增殖带胞浆和胞核表达,晚期主要在增殖带和肥大带胞浆和胞核表达。3.在生长板软骨细胞中表达的CUL7、CCDC8蛋白有促进软骨细胞增殖、分化的作用。4.随着鼠龄的增加,自噬在生长板的活性降低,说明自噬在生长板软骨细胞增殖、分化过程中发挥着作用。
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