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副猪嗜血杆菌(Haempohliusparasuis,HPS)能够引起猪的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎,给全球养猪业带来巨大损失。目前,HPS有15个血清型,部分血清型之间存在交叉保护作用。由于抗生素滥用导致HPS耐药性增强,疫苗免疫成为防治副猪嗜血杆菌病有效的途径。灭活疫苗各种佐剂自身的性质不同,其刺激机体产生抗体及通过缓释作用延长抗体维持时间的机制亦不同,所以选用能显著提高体液免疫作用的佐剂和交叉保护作用强的菌株做抗原对提高疫苗的效力起着重要作用。
本研究用1~15血清型的HPS标准菌株,通过免疫新西兰大白兔制备了抗体效价达1∶32的高免血清。采用制备的高免血清,应用玻板凝集和琼脂扩散试验,结果显示11株分离株中5株为血清5型,1株为血清1型,1株为血清4型,1株为血清12型,1株为血清14型,2株血清型不能确定。分型的结果与标准血清鉴定结果一致。本试验为今后HPS血清型鉴定储备了大量单因子血清。
选用2株HPS分离株(1型LC株和5型LZ株),并对其形态学、生长特性、致病性进行了鉴定。结果表明,LC生长速度较快,而且随着HPS的生长,液体培养液的PH值迅速下降,说明了HPS是一种产酸能力非常强的细菌,最适生长的PH值为7.0。动物感染试验表明,新西兰大白兔接种HPS后临床症状不明显,而小鼠和猪对HPS比较敏感,而且LZ株比LC株致病性强。
通过对铝胶、白油、类脂、蜂胶4种佐剂疫苗的免疫效果比较,筛选出效果最理想的佐剂。试验结果表明白油佐剂组吸收不良,直到试验结束注射部位仍有肿胀;蜂胶佐剂组注射部位红肿;铝胶组和类脂组无肿胀和坏死,无其他不良反应。攻毒保护试验表明,无论是LC株,还是LZ株,铝胶佐剂组的保护率最高,其次是白油佐剂组。通过临床解剖及病理组织切片观察,攻毒后铝胶佐剂免疫组无明显病理变化,而其它三种佐剂组都有不同程度的损伤。四种佐剂抗体效价检测结果也表明铝胶佐剂免疫的效果最好。