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Aurora-A激酶是新近发现的调节中心体、微管功能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在中心体成熟、纺锤体形成、染色体分离,即有丝分裂的正常进行中发挥至关重要的作用。研究表明Aurora-A的过表达可导致中心体异常扩增,染色体的不稳定和非整倍体细胞的形成并导致肿瘤的发生。目前,Aurora-A已被认为是一个与多种恶性肿瘤发生相关的癌基因。众多研究发现,Aurora-A在乳腺癌、胰腺癌、食管癌、胃癌、肺癌、膀胱癌等多种人类恶性肿瘤中高表达。其表达水平与肿瘤的组织学分级、临床分期和患者预后具有相关性。抑制Aurora-A激酶活性,可有效地阻碍细胞的生长、增殖,并引起肿瘤细胞的凋亡。肝细胞肝癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)是我国最常见的高发肿瘤之一,因其恶性程度高、易复发、易转移,故预后差、死亡率高。尽管目前对于HCC的治疗方案日趋完善,但仍难取得令人满意的疗效。近年来,有研究发现肝癌细胞染色体20q区域常常存在扩增,而该区域正是Aurora-A基因位置所在,从而高度提示HCC的发生可能和Aurora-A表达异常有关。因此,本课题将分为3部分对Aurora-A和HCC的关系进行研究:1.应用Real-Time实时定量PCR检测Aurora-A在HCC患者肿瘤组织及癌旁正常组织中mRNA的表达差异,并分析其表达水平与各种临床病理指标和预后的相关性;2.应用RNA干扰技术体外沉默HepG2等肝癌细胞株Aurora-A基因,观察肝癌细胞增殖、凋亡、侵袭转移等生物学行为的改变;3.深入探讨抑制Aurora-A表达影响肝癌细胞生物学行为的内在机制。研究发现,50%(16/32)的HCC患者肝癌组织Aurora-A mRNA表达量明显高于癌旁正常对照组织,两者的差异从1.6倍至148倍不等,且Aurora-A mRNA高表达与患者的年龄、性别、乙肝病毒的感染以及术前AFP水平及肿瘤的大小、组织学分级无明显相关,而和TNM分期显著相关。另外,生存分析发现Aurora-AmRNA高表达患者的预后较差。进而应用RNA干扰抑制Aurora-A在HepG2、MHCC-97H、SMMC-7721三种肝癌细胞株中的表达,MTT实验发现三种肝癌细胞株的生长均受到不同程度的抑制,且表现为一定的时间依赖性;流式细胞术检测显示细胞发生G2/M期阻滞并发生凋亡;此外,HepG2细胞经过Aurora-A RNA干扰后体外迁移和侵袭能力下降,表现为划痕愈合不良以及穿越Matrigel基质胶能力减弱。对抑制Aurora-A表达体外改变肝癌细胞生物学行为的机制研究发现,Aurora-A RNA干扰下调Cyclin B1表达导致细胞发生G2/M期阻滞;同时Aurora-A表达受抑解除了其在过表达状态下对野生型p53(wt-p53)的抑制作用,恢复了wt-p53的正常作用,诱导细胞凋亡,下调MMP-9表达,抑制细胞侵袭能力。综上所述,我们认为Aurora-A与肝癌细胞的各种生物学行为关系密切,其在肝癌组织中的高表达将直接影响HCC患者的预后。随着对Aurora-A的功能及其与HCC相互关系的逐步阐明,Aurora-A有可能成为肝癌治疗中的一个潜在靶点。然而根据抑制Aurora-A活性仅能使表达wt-p53的肝癌细胞发生凋亡的现象,我们推测其在发生p53突变的患者上的应用效果可能不佳。