灵芝与混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝的鉴别研究

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灵芝为多孔菌科(Polyporaceae)真菌赤芝Ganoderma lucidum (Leyss. ex Fr.) Karst或紫芝G. sinense Zhao, Xu et Zhang的干燥子实体。药理实验研究表明,灵芝具有抗肿瘤、抗衰老、调节免疫等活性。灵芝中主要含有多糖、三萜类、核苷类、甾醇类、生物碱类和多种微量元素等。我国地域辽阔,地理和气候条件复杂,灵芝品种繁多,种与种之间性状特征相近,导致目前中药材市场正品灵芝与混淆品混用和替代情况非常严重,常见的混淆品有硬孔灵芝、鹿角灵芝等。本课题从药材的生药学、HPLC色谱指纹图谱、化学成分的含量测定方面对灵芝与其常见混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝进行系统的研究,为灵芝的真伪鉴别和质量评价提供科学的理论依据。本文实验部分包括灵芝与混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝的生药学研究、三萜类成分HPLC-ESI-MS指纹图谱分析和3个灵芝酸成分的含量测定、13个核苷类成分的含量测定:1.对灵芝与混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝分别进行药材性状、显微特征和薄层色谱鉴别研究。研究表明,灵芝与混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝在性状、显微和薄层色谱鉴别特征上存在明显区别,为鉴别灵芝与混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝提供参考依据2.对灵芝与混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝分别进行三萜类成分HPLC-ESI-MS指纹图谱分析和3个灵芝酸成分的含量测定研究。研究表明:以赤芝作为灵芝的标准指纹图谱,与混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝进行比较,鹿角灵芝与标准指纹图谱相似度较高,硬孔灵芝与标准指纹图谱相似度低;用主成分分析(PCA)法对灵芝与混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝三萜类成分指纹图谱进行分析,可以鉴别灵芝与混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝;测定灵芝与混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝的3个主要的灵芝酸类成分(灵芝酸A、B、D)的含量发现,赤芝和鹿角灵芝均含有这三个成分,紫芝只检测到灵芝酸A,硬孔灵芝未能检测到这三个成分。实验表明,灵芝与混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝在色谱指纹图谱及化学成分的种类上存在差别,为色谱技术在灵芝与混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝的鉴别和质量评价提供科学的依据。3.对灵芝与混淆品鹿角灵芝和硬孔灵芝中的13个核苷类成分进行含量测定。研究表明:赤芝的13个核苷总含量要高于混淆品鹿角灵芝,尤其是腺苷含量高于混淆品鹿角灵芝,但灵芝与混淆品硬孔灵芝在13个核苷类成分的含量差别不明显;灵芝药材含有多种核苷类成分,其中尿苷、鸟苷、腺苷为灵芝药材中主要的核苷类成分。核苷类成分可能成为灵芝除灵芝多糖和三萜成分的一类主要活性成分,通过对这类成分的含量分析有利于更好的控制灵芝的质量和疗效的保证。
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