近年来,抗体偶联药物(ADC)已在临床肿瘤治疗中展现出良好的治疗效果.但是,针对EGFR靶点的抗体偶联药物的研发却面临着巨大挑战,其原因正是由于EGFR在人体内分布较为广泛,从肿瘤到正常组织如上皮组织的许多组织均有表达.前期,我们利用Pro-Antibody技术开发出针对EGFR靶点的前抗体,该抗体具有在肿瘤微环境中被特异性激活并靶向EGFR的特性,命名为PanP.在本研究中我们基于前期的成果,首次构建并表达了针对EGFR靶点的前抗体偶联药物(pro-antibody-drug conjugate,PDC)PanP-DM1,简称PDC.期望通过前抗体技术和抗体偶联药物这两种技术的联合运用,使该PDC既能获得肿瘤组织EGFR位点的特异性结合活性,又能获得比常规抗体更强的肿瘤细胞杀伤效应,降低抗EGFR抗体的皮肤毒性反应.试验数据显示,偶联DM1之后的PDC药物依然保持了能被肿瘤组织特异性酶(uPA)酶切激活的特性.在体外、体内功能研究中,我们制备的新型PDC药物也表现出比PanP更强的抗肿瘤活性,尤其是在小鼠移植瘤模型中,使用PDC抗体治疗的试验组小鼠在治疗结束后,肿瘤组织完全消除.为进一步研究该PDC药物的抗肿瘤作用机制,我们通过流式细胞术,研究了细胞周期阻滞效应,结果表明PDC被肿瘤细胞内吞后能在溶酶体的作用下释放大量的微管抑制剂药物——DM1,使细胞周期停滞在G2/M期,从而诱导了细胞的凋亡.最后我们还通过观测小鼠体重减低情况对该药物的非特异毒性(安全性)进行了初步评估.通过本课题,我们构建、表达并制备了一种新型的抗EGFR前抗体偶联药物——PanP-DM1,其不但具有肿瘤靶向特异性,而且具有增强的高肿瘤杀伤活性以及更好的安全性,从而具有良好的成药性及临床应用前景.