DHA微乳制备及质量评价

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本研究采用转相乳化法制备DHA微乳,建立了微乳和血浆中DHA含量的HPLC检测方法。在筛选微乳配方基础上,借助伪三元相图的方法考察了DHA微乳形成的影响因素,最终确定了包封率较高,载药量较大的最优配方。并对制备的DHA微乳的理化性质和质量稳定性进行了研究。主要研究及结果如下:1.建立了微乳和血浆中DHA含量的HPLC检测方法用高效液相色谱仪,对其吸收波长、标准曲线、回收率、精密度、重复性等进行研究。结果表明,DHA在215nm处有最大吸收,微乳中DHA在14.06449.92μg/mL内呈良好的线性关系(R2=0.9997),平均回收率为101.56%RSD=2.11%(n=6)。实验结果表明该方法可靠、简便、重现性好,可作为微乳中DHA含量测定。血浆中DHA在5.59-357.50μg/mL血药浓度范围内线性关系良好,其不同浓度的平均提取回收率为75.42%,平均方法回收率为99.15%,日内精密度RSD为0.29%。符合生物等效性指导原则关于生物样品分析方法的基本要求。2.筛选DHA微乳配方并考察其影响因素用HLB值法和微乳的评价标准,筛选形成微乳的配方;利用伪三元相图,对微乳形成的影响因素进行考察。筛选出可形成微乳的表面活性剂组合,分别为RH-40、EL-40、Tween80:Span80、RH-40:Span80、EL-40:Span80。助表面活性剂为丙三醇,1,2-丙二醇,PEG-40和无水乙醇。油相为IPM和DHA藻油。表面活性剂的种类及Km值,温度是微乳形成最主要和关键的因素。确定了DHA微乳的最佳配方为肉豆蔻酸异丙酯(IPM)/DHA藻油/RH-40/Span-80/PEG-400/去离子水,Km=3:1,制备温度为75℃。3.制备DHA微乳并考察其理化性质按照微乳制备的最佳配方制备出了DHA微乳,考察了其外观、电导率、折光率、黏度、pH值、形态及粒径等理化性质。DHA微乳为O/W型微乳,其外观为淡黄色、澄清透明、流动性好的液体;其电导率为116.4μs/cm、折光率为1.412 nd、黏度为205mpa.s、pH值为5.40。透射电镜下观察其形态为圆球形,分布均匀,平均粒径为49.5nm。4、评价DHA微乳稳定性通过高速离心实验、留样观察实验、加速实验对DHA微乳进行稳定性考察。在考察项目中,分别采用DHA藻油,DHA微乳,添加有0.02%VE油作为抗氧化剂的DHA微乳。结果表明,添加有0.02%VE油的DHA微乳的稳定性要优于DHA藻油和普通微乳,而DHA微乳的稳定性优于DHA藻油。
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