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【目的】为进一步提高体外受精-胚胎移植的临床妊娠率,从分子生物学角度探索不孕症的发病机制,通过筛选微小染色体维持蛋白4(minichromosome maintenance protein 4,MCM4)所对应的基因为研究对象,明确其在体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)周期中的动态变化,分析MCM4及相关因素对IVF-ET妊娠结局的影响及在IVF-ET周期中的变化原因,为临床的诊断和治疗提供思路和依据。【方法】以2017年6月-2017年12月于大理大学第一附属医院生殖医学科行体外受精-胚胎移植的不孕症患者为研究对象,根据IVF-ET的妊娠结局分为妊娠成功组和妊娠失败组,每组各20例患者。所有患者均采用标准长方案进行控制性超促排卵,经阴道超声监测卵泡发育,卵泡成熟后在超声引导下行穿刺取卵,常规体外受精18小时后,观察受精结果,66-68小时后进行碎片评估和胚胎分级,并选择优质胚胎进行移植,于移植15天后,通过血清β-hCG检测结果判断是否妊娠成功。收集所有研究对象的相关临床资料(年龄、不孕年限、体重指数、抗苗勒管激素、卵泡刺激素、黄体生成素、雌二醇、孕酮、人绒毛膜促性腺激素、促性腺激素总用量(Gn总用量)、控制性超促排卵天数(COH天数)、窦卵泡计数、获卵数、受精率、获胚数、优质胚胎数、优质胚胎形成率、移植胚胎数、移植胚胎中优质胚胎占比妊娠结局等)。同时收集两组患者治疗过程中不同时期(行IVF-ET治疗前阶段,Stage I;卵巢刺激开始阶段,Stage II;胚胎移植后15天确认生化妊娠阶段,Stage III)的外周血样本分离淋巴细胞,提取细胞中RNA,然后进行荧光定量PCR检测其MCM4 mRNA表达情况。对相关临床资料及MCM4结果进行分析。【结果】1、两组患者一般资料的比较:两组患者一般资料,年龄、体重指数(BMI)、不孕年限和抗苗勒管激素水平的比较差异无统计学意义(P>0.05)。2、各实验阶段患者激素水平对比:两组患者Stage I和Stage II的卵泡刺激素、黄体生成素、孕酮、雌二醇水平对比,差异无统计学意义(P>0.05),Stage III的孕酮和人绒毛膜促性腺激素水平对比,差异有统计学意义(P<0.05)。3、促排卵情况对比:两组患者促排卵过程中Gn总用量和COH天数对比,妊娠失败组的Gn总用量和COH天数均多于妊娠成功组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者窦卵泡计数的差异无统计学意义(P>0.05)。4、获卵及胚胎情况对比:两组患者获卵总数及获胚数对比,妊娠成功组获得MII卵子数、获得胚胎数及优质胚胎数多于妊娠失败组,差异有统计学意义(P<0.05);但两组患者的获卵总数、受精率和优质胚胎形成率差异无统计学意义(P>0.05)。5、移植情况对比:两组患者的移植胚胎数和移植时子宫内膜厚度对比,差异无统计学意义(P>0.05)。两组移植时的优胚占比、子宫内膜分型和移植中粘液出血情况,差异无统计学意义(P>0.05)。6、各实验阶段患者MCM4表达情况对比:经过比较Ct法换算后,Stage I和Stage III时妊娠成功组患者MCM4 mRNA的表达量显著高于妊娠失败组,差异有统计学意义(P<0.05);妊娠成功组在Stage III时期MCM4 mRNA的表达量显著低于该组Stage I时,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】1、本次研究中不孕症患者基础激素水平无法预测IVF-ET妊娠结局。2、较高的Gn用量和较长的COH时长会影响不孕症患者的卵子成熟度和卵子质量。3、在移植的胚胎数目和质量大致相当且子宫内膜厚度≥8mm的情况下,移植时子宫内膜厚度无法预测IVF-ET妊娠结局。应考虑应用全程动态的子宫内膜检测,并在需要时给予人工干预。4、较高的HCG、孕酮水平,较多的MII卵子数、获得胚胎数、优质胚胎数,以及Stage I期和Stage II期MCM4的高表达是妊娠的保护因素;较高的Gn用量和较长的COH时长是妊娠的危险因素。