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子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)是源于子宫内膜上皮的妇科恶性肿瘤,其发病率在女性恶性肿瘤中位于第六位。对于EC患者,如能早期高效筛查诊断,其预后结果将显著提高。因此,对于EC的早期筛查和诊断以及发病机制的探讨一直是子宫内膜癌治疗研究的热点。FK506结合蛋白38(FK506-binding protein 38,FKBP38)作为免疫亲和素家族的一员,为哺乳动物的雷帕霉素靶标(mammalian target of rapamycin,m TOR)内源性抑制剂,可通过与m TOR相结合来抑制m TOR活性调控下游分子的表达。本课题组前期研究发现,FKBP38蛋白在卵巢癌、乳腺癌等癌组织中表达降低,表明FKBP38蛋白可能与肿瘤的发生发展相关。本研究将系统探讨FKBP38蛋白对于EC细胞生长、转移的抑制作用及相关机制,为EC的临床诊断治疗提供新的可能的靶标。目的:本课题旨在研究FKBP38蛋白在EC细胞中表达水平,其表达量与肿瘤发生发展、转移的相关关系以及FKBP38抑制作用可能的作用机制。方法:检测5株不同病理分级的EC细胞Ishikawa,Hec-1-A,Hec-1-B,RL95-2及AN3Ca中FKBP38基因和蛋白的表达水平,并通过敲减或过表达FKBP38来检测肿瘤细胞生物学行为的变化。1.通过实时荧光定量PCR技术及Western blot技术检测5株人源EC细胞中FKBP38基因和蛋白表达水平变化;2.通过慢病毒感染细胞株来获得稳定敲减或过表达FKBP38的细胞株,通过Western blot技术来检测FKBP38蛋白表达的改变;3.采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(5-Ethynyl-2′-deoxyuridine,Ed U)及平板克隆法检测细胞敲减或过表达FKBP38后细胞增殖能力的变化;4.利用Transwell(无/有基质胶)法检测细胞敲减或过表达FKBP38后细胞迁移及侵袭能力的变化;结果:1.依据国际妇产科联盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)标准定义EC细胞病理分级,发现病理分级越高的EC细胞中FKBP38基因及蛋白表达水平越低。2.Ishikawa细胞中敲减FKBP38后细胞增殖能力显著增强;而AN3Ca过表达FKBP38后增殖能力显著降低;3.Ishikawa及RL95-2敲减FKBP38后细胞迁移及侵袭能力显著增强;而AN3Ca及Ishikawa过表达FKBP38后其迁移及侵袭能力显著降低;4.Ishikawa细胞敲减FKBP38后细胞磷酸化S6核糖体蛋白(Phospho-S6 Ribosomal Protein,P-S6)表达显著升高,AN3Ca细胞过表达FKBP38后细胞磷酸化蛋白激酶B(Phosphorylated protein kinase B,P-AKT)表达显著降低。结论:FKBP38基因和蛋白表达水平与EC的发生、发展和转移显著相关,EC细胞中FKBP38蛋白表达下调可显著促进癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。EC细胞生物学行为的改变可能与调节核糖体蛋白S6(Ribosomal Protein S6,S6)或蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)蛋白的磷酸化水平有关。