【摘 要】
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目的:建立一种检测早孕因子(EPF)的ELISA方法,并进一步探讨该检测方法在早期筛查职业和环境有害因素引起的生殖损伤和某些职业性肿瘤的可行性.方法:筛选可稳定分泌抗EPF单克
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目的:建立一种检测早孕因子(EPF)的ELISA方法,并进一步探讨该检测方法在早期筛查职业和环境有害因素引起的生殖损伤和某些职业性肿瘤的可行性.方法:筛选可稳定分泌抗EPF单克隆抗体的细胞株,经BALB/C小鼠腹腔注射克隆细胞制备腹水型单抗(McAb),腹水经Protein-A亲和层析纯化后、用SDS电泳和Western-blot等方法分析鉴定.用改良碘化钠法进行辣根过氧化物酶(HRP)标记;分析McAb的结合位点,通过抗体配对试验选择合适的捕获和检测McAb,建立双McAb-ELISA检测方法并测定其灵敏度和精密度.用该法检测二硫化碳(CS<,2>)染毒小鼠、黑色素瘤小鼠动物模型、化学致癌物MNU诱导大鼠膀胱癌模型血清标本和膀胱癌病人血清中的EPF活性的变化.结论:获得的抗体为抗EPF特异性单克隆抗体;建立的双McAb夹心ELISA法,有优异的灵敏度和特异度,检测EPF抗原的灵敏度可达到ng水平,其检测结果可靠;初步研究显示该法可应用于早孕诊断,可以检测胚胎植入前期和围植入期的早孕丢失;动物实验提示仅在胚胎植入前期和围植入期接触CS<,2>可引起早孕丢失率升高,但对人群生殖功能的影响尚需进一步的研究;EPF可以做为某些生殖细胞肿瘤和非生殖细胞肿瘤的肿瘤标志物之一,EPF检测有助于膀胱癌的早期辅助诊断,应用于职业接触致膀胱癌物等有害因素高危人群的辅助筛检、恶性肿瘤早期诊断及预后监测的价值,尚有待于进一步研究.
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