岩黄连(Corydalis saxicolae Herba)为罂粟科植物石生黄堇(Corydalissaxicola Bunting)的全草,其生物碱提取物临床用于治疗急性黄疸型肝炎、肝硬化、肝癌、疮疖肿毒、急性肠胃炎等。现代化学与药理研究发现其所含岩黄连碱(脱氢卡维丁)、四氢巴马汀、小檗碱等生物碱类化合物具有抗HBV活性和肝保护活性。为了研制临床使用方便、安全性好的岩黄连总生物碱口服制剂,前期对岩黄连生物碱活性成分的物理性质及其肠道吸收特征进行了研究,结果表明岩黄连生物碱中主要活性成分脱氢卡维丁、盐酸巴马汀与盐酸小檗碱具较强的亲水性,在大鼠十二指肠、空肠、回肠均有吸收,但有效渗透系数较小,且活性成分的转运受肠道转运蛋白外排的影响。根据生物药剂学分类系统,岩黄连提取物中活性成分脱氢卡维丁、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱均属于第三类药物,即具有高溶解性和低渗透性,此类药物的口服吸收易受制剂中辅料的影响,因此在制剂设计时应充分考虑辅料的作用。本文选择常见的具有肠道吸收促进作用的辅料,采用在体、体内、体外模型,研究辅料对岩黄连生物碱活性成分口服吸收的影响,为进一步设计开发岩黄连生物碱高生物利用度口服制剂提供生物药剂学依据。主要研究结果如下。1.采用大鼠在体肠单向灌流模型,以HPLC测定灌流前后灌流液中药物的浓度,计算药物吸收速率常数(Ka)和有效渗透系数(Peff),评价辅料添加对药物肠道吸收的促进作用。结果表明,辅料的品种、浓度对三个活性指标成分肠道吸收具有不同程度的影响,其中5%PEG200、5%PEG400、0.35%Pluronic188、0.5%壳寡糖具有较强的吸收促进作用。2.在上述研究的基础上,进一步采用体内法考察5%PEG200、5%PEG400、0.35%Pluronic188、0.5%壳寡糖、0.35%HP-β-CD、1%吐温-80添加前后,岩黄连生物碱中三个活性指标成分在大鼠体内药动学的变化,采用UPLC-MS/MS测定血药浓度,DAS3.2.2软件计算药代动力学参数。利用各成分曲线下面积(AUC0-t)百分率作为自定义权重系数,计算岩黄连总生物碱大鼠体内综合血药浓度并建立整合药动学研究模型,进一步估算岩黄连总生物碱大鼠体内整合药动学参数。结果表明,5%PEG200、5%PEG400、0.35%Pluronic1 88能显著改变三个活性指标成分的主要药动学参数,使AUC0-t增大、Cmax升高、CLz/F减小,改善各成分的口服生物利用度。0.5%壳寡糖能改善岩黄连生物碱中盐酸巴马汀与盐酸小檗碱的口服生物利用度;0.35%HP-β-CD、1%吐温-80可显著增大岩黄连生物碱中脱氢卡维丁的AUC0-t、减小CLz/F,但对盐酸小檗碱的药动学参数无显著影响;0.35%HP-β-CD使盐酸巴马汀生物利用度降低。观察整合后的药动学参数结果发现,与对照组相比,5%PEG200、5%PEG400、0.35%Pluronic188、0.5%壳寡糖、1%吐温-80 能显著使 AUC0-t增大、Cmax升高、CLz/F减小,改善岩黄连生物碱的口服生物利用度;其中以0.35%Pluronic188、5%PEG200和5%PEG400作用最为明显。3.岩黄连碱(脱氢卡维丁)是岩黄连总生物碱提取物中含量最高的活性成分,其转运受肠道转运蛋白外排的影响,本文采用Caco-2细胞模型,以UPLC-MS/MS测定药物的跨膜转运量,计算跨膜转运表观渗透系数(Papp)与外排比率(ER),评价药用辅料对药物在Caco-2细胞模型上跨膜双向转运的影响。在药物跨膜转运体系中加入药用辅料后,分析外排比率发现0.35%Pluronic188、5%PEG200、5%PEG400、0.5%壳寡糖能够显著降低外排比率,而0.35%HP-β-CD对外排作用无明显影响。4.以药用辅料进行大鼠多次灌胃实验,通过测定大鼠血浆中D-乳酸含量,并对大鼠肠黏膜标本进行病理切片检查,评价药用辅料对大鼠肠黏膜屏障通透性及大鼠肠黏膜组织形态的影响。结果表明,与对照组相比,5%PEG200、5%PEG400组血浆中D-乳酸含量显著增加。5%PEG400、0.35%HP-β-CD组的肠黏膜结构清晰度不高,有黏膜糜烂,溃疡形成;其它实验组肠黏膜内可见少量的炎细胞浸润,局部间质轻度水肿,未见黏膜糜烂,溃疡形成。